NCAGP基因对牛胎儿骨骼肌来源的成肌细胞有丝分裂和成肌分化的影响及机理研究
发布时间：2021-11-14 12:05
肉牛的生长速度和胴体重是肉牛品种优劣的重要标准,能够直接影响肉牛经济效益,因此,培育生长速度快,出肉率高的优质肉牛品种是一项有重要的实际意义的工作。牛骨骼肌的发育起始于妊娠早期,骨骼肌的发育经历了间充质干细胞、肌祖细胞、成肌细胞、初级肌纤维、次级肌纤维几个阶段,在多种转录因子的作用下,逐渐在妊娠后期发育成型。为了探索肉牛生长发育性状重要候选基因NCAPG在牛骨骼肌发育中的机理,通过研究NCAPG在体外成肌分化模型中的作用来初步解释其对生长性状的作用机制。主要通过siRNA干扰NCAPG表达的手段,研究NCAPG对牛胎儿骨骼肌来源的成肌细胞有丝分裂和成肌分化的影响,并探究其作用机理。得到主要结果如下:1、用胶原酶消化法从三月龄的牛胎儿骨骼肌组织中分离成肌细胞,用马血清培养基诱导分化,成肌细胞分化能力较强,诱导后大量细胞融合形成肌管,随着分化时间的增加,MYH1、MYH2、MYH3和MYH4的表达量上调,MYOD和MYF5表达下调,MYOG表达量基本稳定;2、在成肌细胞增殖时期,用siRNA干扰NCAPG表达后,成肌细胞有丝分裂的时间比阴性对照组延长了约25%;3、在成肌细胞分化阶段,用s...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
凝缩蛋白的分子结构(Hirano,2012)
士学位论文 第一章一过程是非必须的。通过干扰 Condensin 的亚基表达来降低细胞中凝胞染色质压缩在细胞分裂前期末才开始，但是随着核膜的崩解，染色都表明 Condensin II 和 Condensin I 对染色质压缩是有先后顺序的，并用不同(Hirota,Gerlich,Koch,Ellenberg,Peters, 2004)。在个体发育水平上，-G2 的基因会导致胚胎致死的发生(Xu et al., 2006a；Smith et al., 2004)。胞中的 1:1 和非洲爪蛙卵细胞提取物中的 5:1 到鸡 DT40 细胞中的 10:1胞中的比例有所不同。Condensin I 和 II 的相对丰度在不同类型的细胞中可能直接反映了两类凝缩蛋白对染色体压缩的不同功能(Ono et al., II 的比例变小（从 5:1 到 1:1），胚胎的细胞染色体变粗变短，当去除 C 1:0 时，染色体变得更长，这一结果有力的证明了 Condensin II 负责 Condensin I 负责染色体的侧向压缩(Shintomi et al., 2011)，如图 1.2。
够对细胞类型特异性的基因表达起调节作用，小鼠 T 细胞的发育和静息状态的维持需sin II 使染色质压缩，CAP-H2 的突变会导致染色质结构开放从而使 T 细胞在正常情况下因表达上调(Rawlings et al., 2011)。鼠科动物的 CAP-G2 能够在红细胞分化成熟的过程中，在这一过程中细胞核逐渐被压缩(Xu et al., 2006a)。Condensin 对胚胎干细胞高度有序压缩及其存活也是必不可少的(Fazzio et al., 2010)。酵母的 Condensin 对于间期染色质的NA 聚合酶 III 转录的基因簇的转录起着重要作用(Iwasaki et al., 2010)。了 Condensin 调控的压缩，组蛋白修饰也可以影响线虫有丝分裂过程中染色质压缩和线偿 X 染色体的结构。在有丝分裂过程的染色体上和有丝分裂间期剂量补偿 X 染色体上生组蛋白 H4 第 20 位赖氨酸一甲基化（H4K20me1）的增加和第 16 位赖氨酸乙酰16ac）的减少(Wells et al., 2012；Oda et al., 2009a；Rice et al., 2002a；Vielle et al., 201s et al., 2014)。在细胞周期中，H4K20 甲基转移酶 PR-Set7 和 H4K20me1 的水平在 G2 期高，并在有丝分裂中保持较高水平，而在 G1 期下降，干扰 PR-Set7 会导致细胞周期的致有丝分裂和间期染色体的解压缩(Oda et al., 2009a)。这表明了 H4K20me1 对于有丝分体压缩的重要性。H4K16ac 的水平在细胞的 S 期增加，而在有丝分裂期间水平下降，这 H4K20me1 对 H4K16ac 具有拮抗作用的发现相一致(Nishioka et al., 2002a)。H4K16ac 去引起H2A和H4临近分子相互作用的增强，导致染色体更高程度的压缩(Shogren-Knaak e
【参考文献】：
期刊论文
[1]全基因组关联分析在畜禽重要经济性状中的研究进展[J]. 乔贤,张磊,李晓凯,范一星,马宇浩,张燕军,刘志红,王瑞军,王志英,王志新,赵艳红,何利兵,李金泉,苏蕊. 家畜生态学报. 2017(10)
[2]全基因组关联分析在畜禽中的研究进展[J]. 王继英,王海霞,迟瑞宾,郭建凤,武英. 中国农业科学. 2013(04)
[3]siRNA分子设计研究进展[J]. 孟庆霞,徐宝林. 吉林大学学报(信息科学版). 2012(02)
博士论文
[1]牛间充质干细胞成肌/成脂分化中差异miRNAs的鉴定及miR-23a调控机制研究[D]. 关龙.中国农业科学院 2017
本文编号：3494605
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
凝缩蛋白的分子结构(Hirano,2012)
士学位论文 第一章一过程是非必须的。通过干扰 Condensin 的亚基表达来降低细胞中凝胞染色质压缩在细胞分裂前期末才开始，但是随着核膜的崩解，染色都表明 Condensin II 和 Condensin I 对染色质压缩是有先后顺序的，并用不同(Hirota,Gerlich,Koch,Ellenberg,Peters, 2004)。在个体发育水平上，-G2 的基因会导致胚胎致死的发生(Xu et al., 2006a；Smith et al., 2004)。胞中的 1:1 和非洲爪蛙卵细胞提取物中的 5:1 到鸡 DT40 细胞中的 10:1胞中的比例有所不同。Condensin I 和 II 的相对丰度在不同类型的细胞中可能直接反映了两类凝缩蛋白对染色体压缩的不同功能(Ono et al., II 的比例变小（从 5:1 到 1:1），胚胎的细胞染色体变粗变短，当去除 C 1:0 时，染色体变得更长，这一结果有力的证明了 Condensin II 负责 Condensin I 负责染色体的侧向压缩(Shintomi et al., 2011)，如图 1.2。
够对细胞类型特异性的基因表达起调节作用，小鼠 T 细胞的发育和静息状态的维持需sin II 使染色质压缩，CAP-H2 的突变会导致染色质结构开放从而使 T 细胞在正常情况下因表达上调(Rawlings et al., 2011)。鼠科动物的 CAP-G2 能够在红细胞分化成熟的过程中，在这一过程中细胞核逐渐被压缩(Xu et al., 2006a)。Condensin 对胚胎干细胞高度有序压缩及其存活也是必不可少的(Fazzio et al., 2010)。酵母的 Condensin 对于间期染色质的NA 聚合酶 III 转录的基因簇的转录起着重要作用(Iwasaki et al., 2010)。了 Condensin 调控的压缩，组蛋白修饰也可以影响线虫有丝分裂过程中染色质压缩和线偿 X 染色体的结构。在有丝分裂过程的染色体上和有丝分裂间期剂量补偿 X 染色体上生组蛋白 H4 第 20 位赖氨酸一甲基化（H4K20me1）的增加和第 16 位赖氨酸乙酰16ac）的减少(Wells et al., 2012；Oda et al., 2009a；Rice et al., 2002a；Vielle et al., 201s et al., 2014)。在细胞周期中，H4K20 甲基转移酶 PR-Set7 和 H4K20me1 的水平在 G2 期高，并在有丝分裂中保持较高水平，而在 G1 期下降，干扰 PR-Set7 会导致细胞周期的致有丝分裂和间期染色体的解压缩(Oda et al., 2009a)。这表明了 H4K20me1 对于有丝分体压缩的重要性。H4K16ac 的水平在细胞的 S 期增加，而在有丝分裂期间水平下降，这 H4K20me1 对 H4K16ac 具有拮抗作用的发现相一致(Nishioka et al., 2002a)。H4K16ac 去引起H2A和H4临近分子相互作用的增强，导致染色体更高程度的压缩(Shogren-Knaak e
【参考文献】：
期刊论文
[1]全基因组关联分析在畜禽重要经济性状中的研究进展[J]. 乔贤,张磊,李晓凯,范一星,马宇浩,张燕军,刘志红,王瑞军,王志英,王志新,赵艳红,何利兵,李金泉,苏蕊. 家畜生态学报. 2017(10)
[2]全基因组关联分析在畜禽中的研究进展[J]. 王继英,王海霞,迟瑞宾,郭建凤,武英. 中国农业科学. 2013(04)
[3]siRNA分子设计研究进展[J]. 孟庆霞,徐宝林. 吉林大学学报(信息科学版). 2012(02)
博士论文
[1]牛间充质干细胞成肌/成脂分化中差异miRNAs的鉴定及miR-23a调控机制研究[D]. 关龙.中国农业科学院 2017
本文编号：3494605
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3494605.html
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