不同Bt抗虫基因对水稻的复合转化和绿色组织特异表达型抗虫水稻的检测与验证
发布时间：2021-11-21 08:50
水稻是世界上最重要的粮食作物之一,而鳞翅目昆虫如螟虫等是水稻生产中的主要虫害,常规的农药防治螟虫不但增加成本投入,而且还容易诱使昆虫产生抗药性。基于单一抗虫基因容易使昆虫产生抗性以及公众对于转基因水稻食用安全性过度担忧的现状,本文从以下两方面开展了研究:聚合两个不同的抗虫基因以培育持久抗虫水稻新材料;对已有转化体进行鉴定和分析以尽快获得我们期望的胚乳零表达型抗虫水稻新材料,并取得了如下研究结果:一、绿色组织特异表达性抗虫水稻新材料的检测与验证利用PCR技术从12个不同的转化体中获得8个纯合的转基因株系。通过Southern杂交,筛选到5个单拷贝的材料。对5个转化系中的Cry1Ab/1Ac蛋白进行定量分析,结果显示:在分蘖期和灌浆期叶片和茎秆中,5个转化系均能检测到抗虫蛋白,叶片中的表达量显著高于茎秆。五个转化系的Cry1Ab/1Ac蛋白含量在整体水平上比阳性对照浙优3号高,部分转化系叶片中的表达量比对照甚至高出10倍左右。在胚乳中,在各转化系内检测值与阴性对照之间没有显著差异,显著低于浙优3号的0.23μg/g。此外,田间对转基因植株进行抗虫鉴定,结果显示野生型对照在人工接虫二化螟后单...
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２．１表迗载体ｐＳＢ１３０－ｒｂｃＳ－ｔｐ－Ｂｔ载体构建图
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是浙优３号的２－１０倍和２－１１倍。而在同一转化系内，分蘖期和灌浆期ＣｒｙｌＡｂ／ｌＡｃ??蛋白的表达量差异不大，说明ＣｒｙｌＡｂ／ｌＡｃ蛋白在整个生育期内都能相对稳定表??迗（图２．３）。??２０??
【参考文献】：
期刊论文
[1]番茄rbcS3A启动子调控的外源基因在转基因番茄中的表达模式（英文）[J]. 徐晓霞,金烨,杨万年. Agricultural Science & Technology. 2013(04)
[2]转基因水稻研发进展[J]. 朱祯. 中国农业科技导报. 2010(02)
[3]高等植物绿色组织特异表达启动子研究进展[J]. 王淼,王旭静,唐巧玲,王志兴,王育青. 中国农业科技导报. 2010(02)
[4]水稻rbcS基因启动子的克隆及结构功能分析[J]. 黄海群,林拥军. 农业生物技术学报. 2007(03)
[5]番茄rbcS3A启动子控制的GUS融合基因在转基因水稻中的表达[J]. 刘巧泉,于恒秀,张文娟,龚志云,顾铭洪. 植物生理与分子生物学学报. 2007(03)
[6]rbcS启动子的克隆及活性鉴定[J]. 王旺田,张金文,刘玲玲,陈正华. 甘肃农业大学学报. 2004(03)
[7]维管束特异表达启动子及其顺式调控元件[J]. 刘昱辉,贾士荣. 生物工程学报. 2003(02)
[8]Expression of ipt gene driven by tomato fruit specific promoter and its effects on fruit development of tomato[J]. MAO Zichao, YU Qiuju, ZHEN Wei, GUO Junyi, HU Yuanlei, GAO Yin & LIN ZhongpingCollege of Life Science, Peking University, Beijing 100871, China. Chinese Science Bulletin. 2002(11)
[9]杨树皮储藏蛋白基因启动子的克隆和功能研究[J]. 蒋浩,秦红敏,田颖川,DeanW.Gabriel. 林业科学. 1999(05)
[10]转基因水稻“克螟稻”选育[J]. 舒庆尧,叶恭银,崔海瑞,项友斌,高明尉. 浙江农业大学学报. 1998(06)
博士论文
[1]一种Bt基因融合策略在治理害虫对转基因玉米和水稻抗性中的应用[D]. 许超.浙江大学 2018
[2]水稻组织特异表达启动子的分离克隆、功能分析及应用[D]. 叶荣建.华中农业大学 2012
[3]双价Bt抗虫水稻的培育和转基因水稻回交效应分析[D]. 杨宙.华中农业大学 2011
[4]苏云金杆菌营养期杀虫蛋白vip3基因及其在转基因水稻中的应用[D]. 方军.浙江大学 2008
硕士论文
[1]双价抗虫转基因水稻的育成和鉴定[D]. 李聪.南京农业大学 2011
本文编号：3509178
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２．１表迗载体ｐＳＢ１３０－ｒｂｃＳ－ｔｐ－Ｂｔ载体构建图
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是浙优３号的２－１０倍和２－１１倍。而在同一转化系内，分蘖期和灌浆期ＣｒｙｌＡｂ／ｌＡｃ??蛋白的表达量差异不大，说明ＣｒｙｌＡｂ／ｌＡｃ蛋白在整个生育期内都能相对稳定表??迗（图２．３）。??２０??
【参考文献】：
期刊论文
[1]番茄rbcS3A启动子调控的外源基因在转基因番茄中的表达模式（英文）[J]. 徐晓霞,金烨,杨万年. Agricultural Science & Technology. 2013(04)
[2]转基因水稻研发进展[J]. 朱祯. 中国农业科技导报. 2010(02)
[3]高等植物绿色组织特异表达启动子研究进展[J]. 王淼,王旭静,唐巧玲,王志兴,王育青. 中国农业科技导报. 2010(02)
[4]水稻rbcS基因启动子的克隆及结构功能分析[J]. 黄海群,林拥军. 农业生物技术学报. 2007(03)
[5]番茄rbcS3A启动子控制的GUS融合基因在转基因水稻中的表达[J]. 刘巧泉,于恒秀,张文娟,龚志云,顾铭洪. 植物生理与分子生物学学报. 2007(03)
[6]rbcS启动子的克隆及活性鉴定[J]. 王旺田,张金文,刘玲玲,陈正华. 甘肃农业大学学报. 2004(03)
[7]维管束特异表达启动子及其顺式调控元件[J]. 刘昱辉,贾士荣. 生物工程学报. 2003(02)
[8]Expression of ipt gene driven by tomato fruit specific promoter and its effects on fruit development of tomato[J]. MAO Zichao, YU Qiuju, ZHEN Wei, GUO Junyi, HU Yuanlei, GAO Yin & LIN ZhongpingCollege of Life Science, Peking University, Beijing 100871, China. Chinese Science Bulletin. 2002(11)
[9]杨树皮储藏蛋白基因启动子的克隆和功能研究[J]. 蒋浩,秦红敏,田颖川,DeanW.Gabriel. 林业科学. 1999(05)
[10]转基因水稻“克螟稻”选育[J]. 舒庆尧,叶恭银,崔海瑞,项友斌,高明尉. 浙江农业大学学报. 1998(06)
博士论文
[1]一种Bt基因融合策略在治理害虫对转基因玉米和水稻抗性中的应用[D]. 许超.浙江大学 2018
[2]水稻组织特异表达启动子的分离克隆、功能分析及应用[D]. 叶荣建.华中农业大学 2012
[3]双价Bt抗虫水稻的培育和转基因水稻回交效应分析[D]. 杨宙.华中农业大学 2011
[4]苏云金杆菌营养期杀虫蛋白vip3基因及其在转基因水稻中的应用[D]. 方军.浙江大学 2008
硕士论文
[1]双价抗虫转基因水稻的育成和鉴定[D]. 李聪.南京农业大学 2011
本文编号：3509178
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