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盐碱胁迫下过表达超氧化物歧化酶基因OsCu/Zn-SOD水稻耐性分析

发布时间:2021-11-28 04:44
  超氧化物歧化酶(SOD)能将超氧阴离子自由基(O2—)快速歧化,将其转化成过氧化氢和分子氧的专一酶类。本研究对OsCu/Zn-SOD蛋白在植物应答盐碱胁迫时的作用进行探讨。以水稻(Oryza satiya)品种龙粳11作为研究材料,利用RT-PCR技术,克隆得到长度为636 bp的叶绿体铜锌超氧化物歧化酶基因(OsCu/Zn-SOD,AK059841)的cDNA,编码211个氨基酸组成的蛋白,它与野生稻和谷子Cu/Zn-SOD蛋白高度同源。qRT-PCR检测到OsCu/Zn-SOD在水稻根中表达量最低,在花和S5叶阶段表达量最高。而且,在L5叶阶段到成熟期期间OsCu/Zn-SOD基因表达量水平降低。通过TargetP软件预测OsCu/Zn-SOD基因可能的亚细胞位置,再利用基因枪转化实验与转OsCu/Zn-SOD::GFP基因拟南芥定位实验,确定了 OsCu/Zn-SOD亚细胞位置在叶绿体中。在NaCl胁迫和NaHC03胁迫下,OsCu/Zn-SOD基因表达水平升高。萌发期检测到过表达OsCu/Zn-SOD株系在125、150和170 mM NaCl胁迫下萌发率和株高的表现好于非转基... 

【文章来源】:东北林业大学黑龙江省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:74 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

盐碱胁迫下过表达超氧化物歧化酶基因OsCu/Zn-SOD水稻耐性分析


图1-1盐胁迫下的一般途径[14]??Fig.?1-1?The?general?pathway?under?salt?stress??通常认为抗氧化胁迫的第一道防线就是超氧化物歧化酶(SOD),能将生物??

盐碱胁迫下过表达超氧化物歧化酶基因OsCu/Zn-SOD水稻耐性分析


图1-2?SOD在整个植?

组氨酸,天冬氨酸,活性中心,可溶性


??图1-2?SOD在整个植物细胞中的位置[39]??Fig.?1-2?Locations?of?SOD?throughout?the?plant?cell??1.2.4铜/锌-超氧化物歧化酶特性??Cu/Zn-SOD氧化型的活性中心是由一个溶剂分子和4个组氨酸(His)以扭曲??的方金字塔形式配位的Cu2+,另一个是由两个组氨酸(His)和天冬氨酸(Asp)??以大致四面体形式配位的Zn2+[7G_71]。而Fe-SOD活性中心则是由三个组氨酸、一??个天冬氨酸和一个0H/H20分子在三角双锥中配位的单一铁离子,该分子由一个??保守的氢键网络(包括谷氨酰胺(Gin)和络氨酸(Tyr))支撑(图1-3)。通过??对比发现,Mn-SOD与Fe-SOD两个酶之间存在结构上相似|45'471。??0146?J?N80????"?W128?〇??,,A80??4今。《??Mn-SOD?(or?Fe-SOD)?CuZn-SOD??图1-3?Mn-SOD或Fe-SOD和Cu/Zn-SOD的活性位点【47]??Fig.?1-3?Active?site?of?Mn-SOD?or?Fe-SOD?and?Cu/Zn-SOD??当空气中完全充满氧气时,可溶性的Fe(II)几乎不存在,不溶性Cu(I)转化为??可溶性Cu(ii)(图1-4)。这一阶段,cu(n)开始被用作sod活性部位的金属辅酶??-5-??

【参考文献】:
期刊论文
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本文编号:3523730

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