黄鳝出血病病原分离、鉴定及气单胞菌对黄鳝病理和免疫基因表达的影响
发布时间：2021-12-10 07:55
黄鳝在我国或者其他亚洲国家是一种重要的经济鱼类,然而细菌性疾病的发病率不断上升严重阻碍了黄鳝养殖产业的发展,且该物种极易受气单胞菌（Aeromonas）感染而发生大规模死亡。因此,探明发病黄鳝的致病病原以及深入了解该物种的免疫系统及其相关免疫基因在感染病原菌时产生的应答机制是极其必要的。本文探明了湖北监利县一养殖场导致黄鳝死亡的致病病原,同时对致病菌进行了药物敏感试验,该研究为临床诊断和科学预防该疾病提供参考。致病病原菌是从患病黄鳝的脾脏、心脏、肝脏和肠道中采集的。经纯化后,通过形态学观察和16S rRNA序列分析对病原体进行鉴定。用人工感染方法测定了病原菌的致病性和组织学特征,用Kirby-Bauer纸片扩散法检测药物敏感性。一种优势菌株从患病的黄鳝的肝和肠组织中分离出来命名为JL-01。分离出的菌落形态相似,16S rRNA序列分析发现该病原菌为维氏气单胞菌（Aeromonas veronii）。人工回归感染健康黄鳝的症状与自然感染下观察到的相同,连续7 d统计人工感染黄鳝导致的死亡率为40-80%,黄鳝在感染2-3天后死亡。该病原菌对黄鳝表现出强烈的致病性,造成组织损伤和死亡。黄...
【文章来源】：长江大学湖北省
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
病鳝临床症状注：A：体表出血；B：肝脏和肾脏出血；C：头部肿大；D：肛门红肿
图 2-3 感染健康黄鳝累计7天死亡率统计注：每尾黄鳝注射200μL维氏气单胞菌浓度为1.50×107cfu，对照组注射同等剂量的PBSFigure 2-3 Cumulative mortality 7 day of infected of healthyAsian Swamp Eelote: Healthy Asian Swamp Eel infected with 1.50×107cfu/fish-1(200μL) of the Aromona veroniiia intraperitoneal injection. The control group was injected with 200μL PBS.
3.3.2 差异表达基因统计分析及差异表达基因聚类分析为了了解黄鳝感染嗜水气单胞菌的分子反应机理，利用嗜水气单胞菌感染黄鳝分析比较转录组，并基于黄鳝基因组中的比对结果，对每个样品组间两两进行差异分析及上下调情况分析，在此基础上统计对照组与攻毒组间的绝对差异表达基因。两两样品组间差异分析结果及上下调情况统计（见图 3-1）。对照组与攻毒组之间总共筛选出 1501 个差异表达基因（DEGS），其中包括 928 个上调基因和 573个下调基因（如图 3-2A），差异表达基因（DEGS）的上调基因，下调基因以及无显著上下调基因的分布情况用火山图显示（如图 3-2B）。具有相似的表达模式的基因通常也会具有相似的功能，对差异表达基因和实验条件进行聚类分析，可判断差异基因在不同实验条件下的表达模式以及识别未知基因的功能或已知基因的未知功能。每个可能的试验条件下的差异表达基因被聚集在一起，用红蓝两种颜色表示差异基因间的差异倍数高低（如图 3-3）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]大黄鱼（Larimichthys crocea）白细胞介素10（IL-10）基因克隆及溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus）侵染后表达变化分析[J]. 侯红红,苗亮,李明云,郭晓飞,杜静雅,陈炯. 海洋与湖沼. 2018(06)
[2]复杂基因组测序技术研究进展[J]. 高胜寒,禹海英,吴双阳,王森,耿佳宁,骆迎峰,胡松年. 遗传. 2018(11)
[3]达氏鲟维氏气单胞菌的分离鉴定及病理组织学观察[J]. 刘亚,杨锐,陈叶雨,宋明江,颜其贵,龚全,李强,杨焕超,赖见生. 南方农业学报. 2018(06)
[4]鱼类免疫应答机制研究进展[J]. 白姗姗,贾智英,石连玉. 水产学杂志. 2017(04)
[5]IL-8在LPS诱导的草鱼炎症过程中的表达特征[J]. 柳昭君,赵杰,卜云璇,肖兰莹,时凯丽,宋学宏. 水产学报. 2017(07)
[6]鰤鱼诺卡氏菌感染斑马鱼模型的建立与组织病理学研究[J]. 夏立群,汪美,赖杰彬,陈锐敏,徐亮,鲁义善. 热带生物学报. 2016(04)
[7]团头鲂致病性维氏气单胞菌的分离鉴定及耐药性分析[J]. 张冬星,康元环,张海月,安鼎杰,单晓枫,钱爱东. 中国兽医科学. 2016(10)
[8]中华鲟细菌性败血症的组织病理学观察[J]. 程广宇,宋志琦,赵德明,周向梅. 黑龙江畜牧兽医. 2016(19)
[9]5种药物对黄鳝体内隐藏新棘虫的驱虫效果研究[J]. 潘庭双,江河,胡玉婷,段国庆. 水产科学. 2016(04)
[10]黄鳝源嗜水气单胞菌DB01分离鉴定及药敏特性研究[J]. 杨移斌,董靖,胥宁,刘永涛,杨秋红,艾晓辉. 淡水渔业. 2016(05)
本文编号：3532198
【文章来源】：长江大学湖北省
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
病鳝临床症状注：A：体表出血；B：肝脏和肾脏出血；C：头部肿大；D：肛门红肿
图 2-3 感染健康黄鳝累计7天死亡率统计注：每尾黄鳝注射200μL维氏气单胞菌浓度为1.50×107cfu，对照组注射同等剂量的PBSFigure 2-3 Cumulative mortality 7 day of infected of healthyAsian Swamp Eelote: Healthy Asian Swamp Eel infected with 1.50×107cfu/fish-1(200μL) of the Aromona veroniiia intraperitoneal injection. The control group was injected with 200μL PBS.
3.3.2 差异表达基因统计分析及差异表达基因聚类分析为了了解黄鳝感染嗜水气单胞菌的分子反应机理，利用嗜水气单胞菌感染黄鳝分析比较转录组，并基于黄鳝基因组中的比对结果，对每个样品组间两两进行差异分析及上下调情况分析，在此基础上统计对照组与攻毒组间的绝对差异表达基因。两两样品组间差异分析结果及上下调情况统计（见图 3-1）。对照组与攻毒组之间总共筛选出 1501 个差异表达基因（DEGS），其中包括 928 个上调基因和 573个下调基因（如图 3-2A），差异表达基因（DEGS）的上调基因，下调基因以及无显著上下调基因的分布情况用火山图显示（如图 3-2B）。具有相似的表达模式的基因通常也会具有相似的功能，对差异表达基因和实验条件进行聚类分析，可判断差异基因在不同实验条件下的表达模式以及识别未知基因的功能或已知基因的未知功能。每个可能的试验条件下的差异表达基因被聚集在一起，用红蓝两种颜色表示差异基因间的差异倍数高低（如图 3-3）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]大黄鱼（Larimichthys crocea）白细胞介素10（IL-10）基因克隆及溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus）侵染后表达变化分析[J]. 侯红红,苗亮,李明云,郭晓飞,杜静雅,陈炯. 海洋与湖沼. 2018(06)
[2]复杂基因组测序技术研究进展[J]. 高胜寒,禹海英,吴双阳,王森,耿佳宁,骆迎峰,胡松年. 遗传. 2018(11)
[3]达氏鲟维氏气单胞菌的分离鉴定及病理组织学观察[J]. 刘亚,杨锐,陈叶雨,宋明江,颜其贵,龚全,李强,杨焕超,赖见生. 南方农业学报. 2018(06)
[4]鱼类免疫应答机制研究进展[J]. 白姗姗,贾智英,石连玉. 水产学杂志. 2017(04)
[5]IL-8在LPS诱导的草鱼炎症过程中的表达特征[J]. 柳昭君,赵杰,卜云璇,肖兰莹,时凯丽,宋学宏. 水产学报. 2017(07)
[6]鰤鱼诺卡氏菌感染斑马鱼模型的建立与组织病理学研究[J]. 夏立群,汪美,赖杰彬,陈锐敏,徐亮,鲁义善. 热带生物学报. 2016(04)
[7]团头鲂致病性维氏气单胞菌的分离鉴定及耐药性分析[J]. 张冬星,康元环,张海月,安鼎杰,单晓枫,钱爱东. 中国兽医科学. 2016(10)
[8]中华鲟细菌性败血症的组织病理学观察[J]. 程广宇,宋志琦,赵德明,周向梅. 黑龙江畜牧兽医. 2016(19)
[9]5种药物对黄鳝体内隐藏新棘虫的驱虫效果研究[J]. 潘庭双,江河,胡玉婷,段国庆. 水产科学. 2016(04)
[10]黄鳝源嗜水气单胞菌DB01分离鉴定及药敏特性研究[J]. 杨移斌,董靖,胥宁,刘永涛,杨秋红,艾晓辉. 淡水渔业. 2016(05)
本文编号：3532198
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