橡胶草橡胶生物合成中SRPP基因的初步探究

发布时间：2021-12-10 09:41

　　橡胶草具有适应性强、种植密集、生长期短、采收自动化和产胶优质等优点,是一种具有极高开发价值的经济作物。本论文提取并测定了橡胶草根部最主要的三种生物产品的含量（w/w%）。橡胶的含量为5.78%～8.1%,菊粉的含量为18.2%～21.5%,蛋白质的含量为7.45%～9.54%。这为橡胶草的选种提供了参考。另外,橡胶草是研究植物橡胶合成机理的理想模型植物,具有很高的科学意义和应用价值。本论文利用qRT-PCR技术先是筛选出了一个可应用于橡胶草体系的内参基因,即β-actin,然后在不同样品中分析了SRPP基因家族与橡胶含量的关系。结果表明,SRPP6可能与橡胶草橡胶的合成与调控作用无关;SRPP1和SRPP2可能直接参与橡胶的合成与调控。SRPP3可能在参与橡胶合成的同时还存在其他生理作用。CRISPR/Cas9系统成本低廉且简便易行,被广泛应用于对植物的基因编辑,本论文首先构建并检测了作用于橡胶草的CRISPR/Cas9双元载体。用转化有双元载体的农杆菌浸染橡胶草根的细根,突变体的存活率为26.7%～33.3%。Sanger测序结果可知srRNA-1植株没有突变,srRNA-2突变体植... 

【文章来源】：北京化工大学北京市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１橡胶草橡胶的生物合成途径（基于Ｔａｏ?Ｌｉｎ等人的研宄做了修改）??Ｆｉｇ．１－１?Ｒｕｂｂｅｒ?ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ?ｐａｔｈｗａｙ?ｏｆ?ＴＫＳ．（Ｔｈｉｓ?ｍａｐ?ｗａｓ?ｄｒａｗ?ｂａｓｅｄ?ｏｎ?

用。巴西橡胶树胶乳是天然橡胶的主要??来源，橡胶延伸因子（及研）和ＩＰ作为胶乳中的两大主要蛋白，被认为参与??了橡胶的合成和调控。橡胶草和橡胶树、银胶菊、一样都有狀尸户之类的蛋白质，??它们都产生高分子量橡胶。Ｗｉｔｉｔｓｕｗａｎｎａｋｕｌ等人认为在乳胶凝固中起作??用，乳胶凝固是密封伤口部位以防止真菌或细菌病原体感染的过程，进一步表明??参与橡胶生物合成或调节。总之，这些结果将与较高分子量橡胶的存在相??关联。??■Ｍ??Ｃ?Ａ?Ｄ??２００?ｎｍ?９?１００?ｎｍ??图１－２巴西橡胶树中橡胶颗粒和狀ＰＰ的微形态特征［８］。（Ａ）橡胶颗粒的ＳＥＭ观察；（Ｂ）??经洗涤五次后洗涤的橡胶颗粒的ＴＥＭ观察；（Ｃ）用抗狀抗体和金缀合的二抗标记的大??橡胶颗粒（ＬＲＰ）的ＴＥＭ观察；（Ｄ）用抗抗体和金缀合的二抗标记的小橡胶颗粒（ＳＲＰ）??的ＴＥＭ观察??Ｆｉｇ．?１－２?Ｍｉｃｒｏｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ?ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｒｕｂｂｅｒ?ｐａｒｔｉｃｌｅｓ?ａｎｄ?ＳＲＰＰ?ｉｎ?Ｈ．?ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ．??（Ａ）?ＳＥＭ?ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｒｕｂｂｅｒ?ｐａｒｔｉｃｌｅｓ．?（Ｂ）?ＴＥＭ?ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｗａｓｈｅｄ?ｒｕｂｂｅｒ?ｐａｒｔｉｃｌｅｓ?ａｆｔｅｒ??ｂｅｉｎｇ?ｗａｓｈｅｄ?ｆｉｖｅ?ｔｉｍｅｓ．?Ｔｈｅｒｅ?ｗｅｒｅ?ｎｏ?ｇｏｌｄ?ｐａｒｔｉｃｌｅｓ?ａｔｔａｃｈｅｄ．?（Ｃ）?ＴＥＭ?ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｌａｒｇｅ??ｒｕｂｂｅｒ?ｐａｒｔｉｃｌｅｓ?（ＬＲＰｓ），?ｌａｂｅｌｅｄ?ｗｉｔｈ?ａｎｔｉ－ＳＲＰＰ?ａｎｔｉｂｏｄｙ?ａ

１１１?｜?｜?ｉ??ｙ＾＼＼?＼?＇?＂?ｊｊｊ?＇?Ｎ＞．?，??３?ｎｎｈｎｎｎｎｎｎｎｎｎ?ｎＮ?Ｃａｓ９?＾?Ｎｃｃ?ｎｎｎｎｎｎｎｎｎｎｎｎ?５??Ｉ?ＩＩ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?審?Ｉ?■?ｔ?Ｉ?ｉ?Ｉ?ＩＩ?ｔ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?酒?Ｉ?ｆ?Ｉ?Ｉ??一?ＮＮＮＮＮＮＮＮＮＮＮＮＮ，，?Ｊｊ）?ｒ．ｇ?Ｎ?Ｎ?Ｎ?Ｎ?ＮＪＩ?Ｎ?Ｎ?Ｎ?Ｎ??ｓ??．．．．．?１?ｇ?－?！?．?．?Ｊ＆Ｓｔ－?Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ??Ｔａｒｇｅｔ?ｗｔ？Ｊ２０ｎｔ）??图１－３?ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａ９系统的敲除机制的图解概述［１１］。绿色和黑色线分别代表ＲＮＡ和基因组??ＤＮＡ分子的骨架；红色箭头表示切割位点；Ｃａｓ９，?Ｃａｓ９蛋白；ｃｒＲＮＡ，ＣＲＩＳＰＲＲＮＡ；?ＰＡＭ，??原型间隔相邻图案；ｓｇＲＮＡ，单指导ＲＮＡ；?ｔｒａｃｒＲＮＡ，反式编码的ＣＲ１ＳＰＲＲＮＡ??Ｆｉｇ．?１－３?Ｄｉａｇｒａｍｍａｔｉｃ?ｏｖｅｒｖｉｅｗ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ?ｍｅｄｉａｔｅｄ?ｃｌｅａｖａｇｅ?ｍｅｃｈａｎｉｓｍ．?Ｇｒｅｅｎ?ａｎｄ??ｂｌａｃｋ?ｌｉｎｅｓ?ｒｅｐｒｅｓｅｎｔ?ｔｈｅ?ｂａｃｋｂｏｎｅ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＲＮＡ?ａｎｄ?ｇｅｎｏｍｉｃ?ＤＮＡ?ｍｏｌｅｃｕｌｅ，?ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．?Ｒｅｄ??ａｒｒｏｗ?ｉｎｄｉｃａｔｅｓ?ｔｈｅ?ｃｌｅａｖａｇｅ?ｓｉｔｅｓ．?Ｃａｓ９，?（ＣＲＩＳＰＲ）－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ?ｐｒｏｔｅｉｎ?９；?ｃｒＲＮＡ，?ＣＲＩＳＰＲ?ＲＮＡ；??ＰＡＭ，?ｐｒｏｔｏｓｐａｃｅｒ?ａｄｊａｃｅｎｔ?ｍｏｔｉｆｓ；?ｓｇＲＮＡ，?Ｓｉｎｇｌｅ?ｇｕｉｄｅ?ＲＮ

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本文编号：3532363