CYP2C9及OATP1B1/1B3基因多态性对格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪代谢转运影响的分子学机制

发布时间：2021-12-31 04:01

　　背景:磺酰脲类降糖药是目前非胰岛素依赖型糖尿病治疗中主要使用的降糖药之一,虽然应用广泛,但其降糖疗效和毒副作用呈现明显的个体差异给临床应用带来困扰和风险。OATP1B1、OATP1B3的基因多态性会影响转运体的功能活性,CYP2C9的基因多态性也会导致酶的活性改变这是导致用药个体差异的重要原因。已经证实格列美脲、格列苯脲和格列吡嗪是CYP2C9的底物,同时我们实验室前期研究表明格列美脲是OATP1B1转运摄取底物,格列苯脲和格列吡嗪是OATP1B3转运摄取底物。那么格列美脲、格列苯脲和格列吡嗪在体内的转运与代谢可能受其基因多态的影响,从而导致疗效和毒副作用的个体差异出现。本课题研究目的在于探究转运体OATP1B1/1B3和代谢酶CYP2C9的基因多态性对格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪的转运代谢之间的影响机制,为磺酰脲类降糖药物能够在临床上得以更合理有效安全的应用从而为实现个体化用药提供理论基础和实验依据。目的:通过建立CYP2C9*1、*2、*3重组酶模型和稳定高表达的OATP1B1*1a、*5、*15以及OATP1B3、OATP1B3（344T>G）、OATP1B3（699G&g... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
中英文缩略词表
第1章 前言
第2章 格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪在不同基因型CYP2C9中代谢差异研究
    2.1 材料
        2.1.1 主要仪器与设备
        2.1.2 药品及试剂
    2.2 方法
        2.2.1 溶液的配制
        2.2.2 格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪代谢孵育方法及样品处理方法建立
        2.2.3 格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪在CYP2C9重组酶孵育体系中的LC-MS定量检测
        2.2.4 格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪在各基因型CYP2C9重组酶中酶促动力学反应条件的探索
        2.2.5 统计分析
    2.3 结果
        2.3.1 方法学专属性
        2.3.2 重组酶中格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪定量测定线性范围的确定
        2.3.3 提取回收率
        2.3.4 准确度与精密度
        2.3.5 不同基因型CYP2C9重组酶中格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪酶促动力学条件分析
        2.3.6 不同基因型CYP2C9重组酶对格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪的酶促动力学比较
    2.4 小结
第3章 格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪在不同基因型OATP1B1/1B3细胞中的转运研究
    3.1 材料
        3.1.1 细胞株
        3.1.2 主要仪器与设备
        3.1.3 主要药品与试剂
    3.2 方法
        3.2.1 主要溶液配制
        3.2.2 HEK293T细胞培养及其生长曲线的绘制
        3.2.3 格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪对HEK293T细胞毒性测定
        3.2.4 BCA法测定HEK293T细胞裂解液蛋白含量
        3.2.5 细胞样品中格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪LC-MS检测方法的建立
        3.2.6 格列美脲在不同基因型OATP1B1-HEK293T细胞中的摄取实验
        3.2.7 格列苯脲、格列吡嗪在不同基因型OATP1B3-HEK293T细胞中的摄取实验
        3.2.8 统计分析
    3.3 结果
G), (699G>A)- HEK293T细胞的培养和生长曲线绘制">        3.3.1 OATP1B1*1a,*5,*15-HEK293T和OATP1B3，(344T>G), (699G>A)- HEK293T细胞的培养和生长曲线绘制
        3.3.2 格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪对HEK293T细胞毒性测定结果分析
        3.3.3 HEK293T细胞裂解液蛋白曲线的绘制
        3.3.4 细胞样品中格列美脲、格列苯脲、格列吡嗪LC-MS方法学测定分析
        3.3.5 格列美脲在不同基因型OATP1B1-HEK293T摄取动力学分析
        3.3.6 格列苯脲在不同基因型OATP1B3-HEK293T摄取动力学分析
        3.3.7 格列吡嗪在不同基因型OATP1B3-HEK293T摄取动力学分析
    3.4 小结
第4章 结论与展望
    4.1 结论
    4.2 展望
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
综述
    参考文献



本文编号：3559579