生物纳米泡联合聚焦超声在基因靶向递送中的应用研究
发布时间：2022-01-12 22:21
目的:使用从嗜盐杆菌NRC-1（Halobacterium NRC-1,Halo）中提取并纯化生物合米泡（Biosynthetic nanobubble,BNBs）,通过将其与PEI共孵育的方式构建一种新型纳米级阳离子非病毒载体（Cationic biosynthetic nanobubble,CBNBs）并进一步制备搭载质粒DNA的CBNBs（Plasmid DNA loaded CBNBs,DNA/CBNBs）转染复合物。最终在体外细胞模型以及体内肿瘤模型中评价该材料联合聚焦超声在基因靶向递送中的效果并与传统材料进行比较分析。方法:1.第一部分:（1）.培养Halo,待细菌增殖到一定程度后,将培养基转移至分液漏斗中并通过静置的方式,初步分选内含BNBs（漂浮至溶液顶层）与不含BNBs（下沉至溶液底层）的细菌。（2）.提取上层溶液并使用低渗透冲击法破坏Halo细胞膜,使其释放内含的BNBs。使用低速离心法分离细胞碎片与BNBs并通过重复操作的方式纯化BNBs,最终获取只含BNBs的溶液。（3）.成功提取并纯化BNBs后,使用透射电镜（Transmission electron mic...
【文章来源】：新疆医科大学新疆维吾尔自治区
【文章页数】：116 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
Halo的培养及BNBs的提取流程示意图
图 2 Halo 的培养及 BNBs 的提取过程中各阶段实物图Fig.2 Pictures of different stages: 培养约 2 周的 Halo 培养基，培养基颜色逐渐变亮；B: 培养基在分液漏斗中静置 形成粉白色环，为漂浮至顶端的 Halo；C: 弃去下层溶液，只保留上层粉白色培养加入 TMC 裂解液裂解 Halo，释放 BNBs；D: 加入裂解液的溶液离心后分为两层
图 3 BNBs 的表征分析Fig.3 General characteristics of BNBsA:TEM 下 BNBs 的形态。BNBs 呈梭形结构，长度约为 100~300nm，宽度约为 220~2: TEM 下 MBs 的形态。MBs 呈圆球形结构，直径在 800~2000 nm 之间；C: BNBs 的情况；D: MBs 的粒径分布情况；E: BNBs 与 MBs 的 Zeta 电位分析；F: BNBs 体积
本文编号：3585550
【文章来源】：新疆医科大学新疆维吾尔自治区
【文章页数】：116 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
Halo的培养及BNBs的提取流程示意图
图 2 Halo 的培养及 BNBs 的提取过程中各阶段实物图Fig.2 Pictures of different stages: 培养约 2 周的 Halo 培养基，培养基颜色逐渐变亮；B: 培养基在分液漏斗中静置 形成粉白色环，为漂浮至顶端的 Halo；C: 弃去下层溶液，只保留上层粉白色培养加入 TMC 裂解液裂解 Halo，释放 BNBs；D: 加入裂解液的溶液离心后分为两层
图 3 BNBs 的表征分析Fig.3 General characteristics of BNBsA:TEM 下 BNBs 的形态。BNBs 呈梭形结构，长度约为 100~300nm，宽度约为 220~2: TEM 下 MBs 的形态。MBs 呈圆球形结构，直径在 800~2000 nm 之间；C: BNBs 的情况；D: MBs 的粒径分布情况；E: BNBs 与 MBs 的 Zeta 电位分析；F: BNBs 体积
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