CDH1基因启动子区DNA甲基化修饰对胰腺癌细胞的作用研究

发布时间：2022-01-19 05:23

　　胰腺癌是常见的消化系统恶性肿瘤,恶性程度高,早期诊断困难,预后极差,目前仍缺乏有效治疗手段。DNA甲基化是主要的表观遗传修饰之一,与肿瘤发生发展密切相关。鉴定肿瘤细胞异常DNA甲基化变化,并针对性地进行调节将有利于肿瘤的诊断和治疗。CDH1（Cadherin 1）基因位于人染色体16q22,编码E-钙粘蛋白,参与调节细胞粘附、迁移和上皮细胞增殖。CDH1基因的突变与胃癌、乳腺癌、结直肠癌、甲状腺癌和卵巢癌密切相关,研究表明,DNA甲基化在CDH1基因的表达调节中起作用,但在不同肿瘤中作用有差异。本研究检测了CDH1在不同胰腺癌细胞中的基因表达及启动子区DNA甲基化水平,通过转染载体CRISPR/dCas9-Dnmt3a和gRNA-CDH1,检测DNA甲基化影响CDH1基因表达及对细胞恶性表型的作用,并探讨了特异位点DNA甲基化修饰在肿瘤治疗中的潜在应用。1、胰腺癌中DNA甲基化对基因表达的影响根据已发表的论文筛选肿瘤相关基因EGFR、HOXB5、CDH1、DDR2和RUNX3。为研究基因启动子区DNA甲基化对基因表达的作用,利用实时定量PCR检测基因mRNA表达,重亚硫酸氢盐测序PCR... 

【文章来源】：内蒙古大学内蒙古自治区 211工程院校

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

不同细胞系中EGFR的表达水平和DNA甲基化水平

图 2.2 不同细胞系中 HOXB5 的表达水平和 DNA 甲基化水平。A. DNA 甲基化水平。B. 基因表达水平（***表 p<0.001）。Fig. 2.2 HOXB5 gene expression and DNA methylation in different cell lines.ethylation levels of HOXB5 promoter regions. B. Expression levels of HOXB5 mRN因表达及其启动子区 DNA 甲基化检测结果显示，与正常胰腺细胞 HPC-Y5 相比，DDR2 在癌细胞 PANC-1 中1），在 CFPAC-1 中表达升高。测序结果分析发现：DDR2 启动子区甲胞 HPC-Y5 中为 90%，与之相比，在胰腺癌细胞 PANC-1 和 CFPAC-5%、95%。两者结果比较发现在胰腺癌中所检测的 DDR2 基因启动子不相关。

图 2.3 不同细胞系中 DDR2 的表达水平和 DNA 甲基化水平。A. DNA 甲基化水平。B. 基因表达水平（***表 p<0.001）。Fig. 2.3 DDR2 gene expression and DNA methylation in different cell lineylation levels of DDR2 promoter regions. B. Expression levels of DDR2 m表达及其启动子区 DNA 甲基化检测显示，与正常胰腺细胞 HPC-Y5 相比，RUNX3 在癌细胞 PAN（P<0.001）。测序结果分析发现：RUNX3 启动子区甲基化胰腺癌细胞 PANC-1、CFPAC-1 中均为大于 90%。两者结果RUNX3 基因启动子区 DNA 甲基化与其表达不相关。

【参考文献】：
期刊论文
[1]可切除胰腺癌新辅助治疗价值及评价[J]. 梁廷波,白雪莉,李想.  中国实用外科杂志. 2018(07)
[2]CRISPR/Cas9基因组定向编辑技术的发展与在作物遗传育种中的应用[J]. 景润春,卢洪.  中国农业科学. 2016(07)
[3]晚期癌症患者姑息治疗的现状与建议[J]. 王继伟,陈学芬,宫霄欢,赵德余,高晶蓉,袁正平,余金明.  中华医学杂志. 2014 (07)



本文编号：3596285