微纤维相关蛋白5调控上皮-间质转化相关基因促进膀胱癌细胞迁移和侵袭

发布时间：2022-01-22 02:46

　　目的探讨微纤维相关蛋白5（MFAP5）在膀胱癌中的表达水平及其对膀胱癌细胞的生物学作用。方法收集上海交通大学附属第一人民医院确诊的膀胱癌患者手术切除标本,通过免疫组织化学染色检测MFAP5的表达情况。分别从膀胱肿瘤组织和正常膀胱组织分离纯化得到肿瘤相关成纤维细胞（CAF）和正常成纤维细胞（NF）,通过qRT-PCR检测CAF、NF及人膀胱癌细胞系（T24、5637、UMUC3、J82）中MFAP5 mRNA的相对表达量。通过美国癌症基因组图谱（TCGA）数据库及基因表达汇编（GEO）数据库GSE13507数据集中的膀胱癌表达谱数据,分析MFAP5表达与膀胱癌进展和恶性程度的相关性。用重组人MFAP5蛋白处理膀胱癌细胞系T24、5637,检测其对细胞迁移和侵袭能力及迁移相关蛋白表达的影响。结果 MFAP5在膀胱癌组织中主要表达于肿瘤间质,其表达水平与膀胱癌T分期和肿瘤分级有关（P均<0.05）,并且CAF中MFAP5 mRNA相对表达量高于NF、T24、5637、UMUC3、J82细胞（P均<0.01）。TCGA和GSE13507数据库分析结果均显示,高表达MFAP5的膀胱癌... 

【文章来源】：第二军医大学学报. 2020,41(06)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

MFAP5表达水平与EMT相关分子密切相关

表 2 蛋白质印迹法检测rhMFAP5处理后膀胱癌细胞EMT相关蛋白表达定量结果Tab 2 Quantitative results of EMT-related protein expression in bladder cancer cells treated with rhMFAP5 detected by Western blottingn=3,xˉ±s Protein rhMFAP5 (ng ? mL-1) 0 200 400 T24 cell E-cadherin 0.980±0.036 0.530±0.091* 0.333±0.026** N-cadherin 1.023±0.071 2.167±0.144** 3.337±0.180** MMP9 0.997±0.069 2.077±0.100** 2.227±0.087** ZEB1 0.957±0.048 1.330±0.075* 1.973±0.139** Twist 1.043±0.130 1.280±0.024* 2.687±0.118** 5637 cell E-cadherin 0.980±0.034 0.597±0.062* 0.533±0.026** N-cadherin 1.010±0.086 2.097±0.161** 3.203±0.060** MMP9 1.010±0.054 2.050±0.049** 2.227±0.078** ZEB1 0.967±0.048 1.430±0.065* 2.107±0.107** Twist 1.043±0.130 1.380±0.024* 2.520±0.170**rh MFAP5:Recombinant human microfibril-associated protein 5;EMT:Epithelial-mesenchymal transition;MMP9:Matrix metalloproteinase 9;ZEB1:Zinc-finger E-box-binding protein 1.*P<0.05,**P<0.01 vs 0 ng/m L rh MFAP5 group3 讨 论

切片免疫组织化学结果(图1)显示,在正常膀胱上皮组织和非肌层浸润性膀胱癌组织中,MFAP5在间质组织中呈低表达状态;而在肌层浸润性膀胱癌组织中,MFAP5高表达于肿瘤间质。肌层浸润性膀胱癌组织中MFAP5的染色评分[(2.04±0.15)分,n=20]高于非肌层浸润膀胱癌组织[(1.20±0.15)分,n=30)],差异有统计学意义(P<0.01)。如表1所示,MFAP5的表达水平与膀胱癌T分期和肿瘤分级有关(P<0.01、P<0.05)。qRT-PCR检测结果显示,CAF中MFAP5 mRNA相对表达量(25.07±1.34,n=3)高于NF及人膀胱癌细胞系T24、5637、UMUC3、J82(5.38±0.04、1.14±0.09、2.56±0.10、0.60±0.19、0.98±0.12,n=3),差异均有统计学意义(P均<0.01)。表 1 MFAP5表达与膀胱癌患者临床病理特征的关系Tab 1 Correlation between MFAP5 expression and clinicopathological features of bladder cancer patientsn Characteristic N MFAP5 expression χ2 value P value High Low Gender 0.936 0.333 Male 37 20 17 Female 13 5 8 Age (year) 1.299 0.254 ≥65 28 16 12 ＜65 22 9 13 T stage 6.750 0.009 Ta-1 30 10 20 T2-4 20 15 5 Tumor grade 4.160 0.041 Low 19 6 13 High 31 19 12 N stage 2.168 0.141 N0 41 18 23 ≥N1 9 7 2 MFAP5:Microfibril-associated protein 5


本文编号：3601413