蒲公英抗氧化酶基因的克隆与盐胁迫表达分析

发布时间：2022-01-23 22:47

　　利用同源克隆技术从蒲公英中克隆到铜锌超氧化物歧化酶基因（Cu/ZnSOD）、抗坏血酸过氧化物酶基因（APX）和过氧化氢酶基因（CAT）3个抗氧化酶基因,采用生物信息学方法分析基因编码的氨基酸序列,利用实时荧光定量PCR方法对盐胁迫下的基因表达进行检测,以了解盐胁迫下抗氧化酶系统变化机理。结果显示:蒲公英Cu/ZnSOD、APX和CAT的编码区序列长度分别为474、852和1 479 bp,分别编码157、283和492个氨基酸残基的抗氧化酶。多序列比对和物种进化关系表明,蒲公英3个抗氧化酶基因与莴苣和向日葵中相关基因的氨基酸序列同源性最高;与0 h相比,盐胁迫处理3 h和6 h时,3个抗氧化酶基因的表达量迅速增加,12 h时又有所降低;海水复合盐胁迫对Cu/ZnSOD的影响相较于NaCl单盐胁迫有所提高。综上所述,盐胁迫快速诱导了蒲公英抗氧化酶基因的表达,以抵抗逆境胁迫,但经过一段时间的高盐胁迫后,过量的活性氧在植株内大量积累,对其细胞造成严重的损害,酶活性降低,植株正常生长受到抑制,细胞内基因的表达亦受到影响。 

【文章来源】：西北农业学报. 2020,29(11)北大核心CSCD

【文章页数】：9 页

【部分图文】：

TmoCu/ZnSOD1、 TmoAPX1和 TmoCAT1基因扩增产物

TmoCu/ZnSOD1与其他植物Cu/ZnSODs氨基酸序列的比对

图2 TmoCu/ZnSOD1与其他植物Cu/ZnSODs氨基酸序列的比对将克隆得到的蒲公英3个抗氧化酶基因与其他11个物种的抗氧化酶基因的氨基酸序列进行多序列比对,序列同源性见表2,结果表明,TmoCu/ZnSOD1与莴苣中的Cu/ZnSOD氨基酸同源性最高(93.63%),其次为向日葵(84.71%),然后是番茄(84.08%)、棉花(81.17%),与其他物种氨基酸同源性小于80%。TmoAPX1与莴苣和向日葵APX氨基酸同源性均大于90%,与棉花、毛果杨、葡萄和番茄同源性均大于80%,与其他物种氨基酸同源性小于80%。TmoCAT1与其他11个物种的CAT氨基酸同源性均大于80%,与莴苣、向日葵和毛果杨同源性较高。

【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
[1]盐胁迫对大豆光合作用和抗氧化系统的影响及其调控机制[D]. 陆开形.浙江大学 2008

硕士论文
[1]农杆菌介导丹东蒲公英遗传转化研究[D]. 刘越.沈阳农业大学 2018



本文编号：3605304