基于TaqMan实时荧光PCR技术检测转基因作物中的调控基因

发布时间：2022-01-24 04:39

　　为检测食品中的植物转基因成分,自主构建ppCaMV35S、ptNOS和ptCaMV35S 3种阳性质粒作为试验阳性对照,选用2种内源基因（pUbi、pRice-actin）和3种调控基因（pCaMV35S、tNOS和tCaMV35S）,利用TaqMan实时荧光PCR技术对4种转基因作物（玉米、水稻、棉花、大豆）和2种非转基因作物（玉米、小麦）进行转基因成分检测。特异性检测结果表明,构建的阳性质粒能够满足实际检测需要,且内源基因和其他调控基因均具有较好的特异性。在转基因棉花试样中分别对调控基因pCaMV35S和tNOS进行检出限试验,检测结果显示,在转基因棉花试样中pCaMV35S和tNOS的检测限度分别为1、10 ng,能够对商业化或处于中间试验阶段的转基因作物及产品进行有效筛查检测。 

【文章来源】：河南农业科学. 2020,49(11)北大核心

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

阳性质粒扩增曲线

不同基因在不同样品中的特异性扩增曲线

表4 调控基因(pCaMV35S、tNOS)引物和探针的检出限检测结果Tab.4 Result of LOD test for regulatory gene (pCaMV35S, tNOS) primers and probes 基因组DNA/(ng/μL) Genomic DNA Ct值 Ct Value pCaMV35S tNOS 100 28.17±0.33 28.05±0.40 10 31.47±0.27 31.79±0.16 1 34.18±0.39 35.09±0.39 0.1 35.87±0.26 38.99±1.22 0.01 36.60±0.64 39.26±0.84 0.001 36.36±0.35 37.59±0.52 0.000 1 35.68±0.84 39.33±1.14 0.000 01 36.09±0.39 39.32±0.723 结论与讨论

【参考文献】：
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本文编号：3605865