水稻LRR-RLK基因OsRK2耐受干旱及盐胁迫的功能研究
发布时间：2022-01-27 22:19
干旱、高盐胁迫是影响植物的生长发育的主要原因。在遭受非生物胁迫威胁时,植物通过受体感知、转导胁迫信号,启动一系列抗逆相关基因的表达,最终缓解或抵御非生物胁迫对植物造成的伤害。其中,蛋白激酶作为上游信号途径的组分,往往如“开关”一样发挥着关键作用。通过感知外界环境胁迫信号,之后激活胞内不同的蛋白磷酸化途径,进而调控下游耐逆基因的转录表达,启动相应的耐逆生理生化过程,使其成为参与植物耐逆响应机制的重要组成部分。Genevestigator分析发现水稻LRR-RLK基因OsRK2受干旱和盐胁迫诱导上调表达,这暗示着OsRK2基因可能参与水稻的非生物胁迫响应过程。为了明确蛋白激酶基因OsRK2的生物学功能,开展了本课题研究。我们用RT-PCR、qRT-PCR检测了 OsRK2基因在逆境处理不同时间后的表达水平。结果显示,OsRK2显著受到盐和干旱胁迫的诱导表达。另外,干旱处理后,OsRK2pro::GUS染色显著加深。OsRK2的亚细胞定位分析表明其定位于细胞质膜上。当用盐、干旱分别处理OsRK2的敲除株系和拟南芥过表达株系,发现rk2敲除系的萌发率、根长、芽长等生长均受到抑制,其耐受性显著低...
【文章来源】：山东大学山东省211工程院校985工程院校教育部直属院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１植物中ＬＲＲ－ＲＬＫ的结构特征??
山东大学硕士学位论文??三结果与分析??１?受非生物胁迫以及ＡＢＡ的诱导??１．１仇／＾２受干旱诱导??依据?Ｇｅｎｅｖｅｓｔｉｇａｔｏｒ?芯片数据平台（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ＿ｇｅｎｅｖｅｓｔｉｇａｔｏｒ．ｃｏｍ）预测，??如（图３小１Ａ）所示，Ｏｓ／＾２基因在多种组织中、在不同的干旱处理条件下，??表达均受到显著诱导。为了验证该结果，我们用２０％?ＰＥＧ８０００模拟干旱环境，??对两周大的野生型水稻幼苗进行处理，利用ｑＲＴ－ＰＣＲ?（图３－１－１Ｂ）和ＲＴ－ＰＣＲ??检测Ｏｓ７＾２?（图３－１－１Ｃ）的表达。结果表明，Ｏｓ／＾２基因随着ＰＥＧ处理时间??的增加，表达水平不断上调，并且在２４?ｈ时表达量最高，达到处理前的１１??倍。这些数据说明０ＳＷＫ２可能参与调控水稻对干旱胁迫的适应性。??Ａ?ＯＳ－００２２５?ｄｅｈｙｄｒａｔｉｏｎ?ｓｔｕｄ）?３?（Ｏｈａｇａｄｄｅｓｈｉ．?３ｔｉ｝?／?ｕｎｔｒｅａｔｅｄ?ｓｅｅｄｌｉｎｇ?ｓａｍｐｌｅ?＾?２！?３?ｋ?１１?ｍ?＜〇〇〇’??＾?ＯＳ－００２２５?ｄｅｈｙｄｒａｂｏｎ?ｓｔｕｄｙ?３?（Ｄｈａｇａｄｄｅｓｈｉ．?６ｈ）?／?ｕｎｔｒｅａｔｅｄ?ｓｅｅｄｌｉｎｇ?ｓａｍｐｌｅ?１９?３．ｓｏ?１３?ｗ?＜〇〇〇＇??ＯＳ－００２２５?ｄｅｈｙｄｒａｔｉｏｎ?ｓｔｕｄｙ?３?（ＩＲ２０．３ｈ）?／?ｕｎｔｒｅａｔｅｄ?ｓｅｅｄｉｎｇ?ｓａｍｐｌｅｓ?（ＩＲ２０）?ｔ?８１?＇?９ｉ?３?８Ｓ?？〇〇〇＇??ＯＳ－００２２５?ｄｅｈｙｄｒａｔｉｏｎ?ｓｈｕｔｙ?３?（ＩＲ２０．６ｈ）?＾ｕｎｔｒｅａｔｅｄ?ｓｅｅｄｌｉｎｇ?ｓａｍｐｌｅｓ?（ＩＲ２０
山东大学硕士学位论文??达水平，结果如（图３－１－２Ａ３）所示，Ｏｓ７＾２基因受到ＮａＣｌ的显著诱导，在??２４?ｈ时达到了处理前的１３倍。同时ＲＴ－ＰＣＲ的结果也证明了?Ｏｓ兄Ｏ的诱导情??况（图３－１－２Ｃ）。进一步说明０ｓ／？Ａ：２基因不仅可以对干旱胁迫做出响应，也对??盐响应强烈，０ＳＡＫ２基因在水稻适应非生物胁迫的过程中可能发挥作用。??Ａ?１５?Ｂ??￥?１４－?—??｜?１２＿?■?１５０ｍＭ?ＮａＣｌ??ｉｏ－?■?Ｃｏｎｔｒｏｌ?６ｈ?１２ｈ?２４ｈ??丄■?謹２?—１１！??■?■?Ａｃｔｉｎ??Ｉ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?６ｈ?１２ｈ?２４ｈ??１５０ｍＭ?ＮａＣｌ??图３－１－２?ａｗ？／ｉｒ２基因受盐诱导表达??Ａ：?１５０?ｍＭ?ＮａＣｌ处理２周龄水稻后定量ＰＣＲ检测ａｓ？沿：２的诱导表达水平??Ｂ：?１５０?ｍＭ?ＮａＣｌ处理后的半定量检测结果??１Ｊ仏尺们基因受ＡＢＡ诱导??我们还用ＡＢＡ进行了处理，利用半定量检测Ｏｓ／＾２的表达水平。结果如??（图３－１－３）所示，Ｏｓ／ＪＧ基因经过ＡＢＡ处理之后，在６ｈ条带亮度明显增??强，这说明基因对ＡＢＡ有一定的响应。??Ａ巳Ａ?ｔｒｅａｔｍｅｎｔ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?３ｈ?６ｈ?１２ｈ??ＡＣＴＩＮ?■?ｆ??０ｓＲＫ２【１?１?｜??图３－丨－３?ａ、７？０基因受ＡＢＡ诱导上调??注：ＡＢＡ处理２周龄水稻３?ｈ，?６ｈ，?１２?ｈ后，半定量检测ＣＵ尤２的表达水平??２?转基因植株的获得??２．１水稻过表达植株的获得??２．１．１仍／？反２基因的克隆和中间载体构建??为进一步探宄基因的生物学功能，我们通过
【参考文献】：
期刊论文
[1]茉莉酸甲酯（MeJA）对水稻幼苗的抗旱生理效应[J]. 董桃杏,蔡昆争,张景欣,荣辉,谢国政,曾任森. 生态环境. 2007(04)
本文编号：3613183
【文章来源】：山东大学山东省211工程院校985工程院校教育部直属院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１植物中ＬＲＲ－ＲＬＫ的结构特征??
山东大学硕士学位论文??三结果与分析??１?受非生物胁迫以及ＡＢＡ的诱导??１．１仇／＾２受干旱诱导??依据?Ｇｅｎｅｖｅｓｔｉｇａｔｏｒ?芯片数据平台（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ＿ｇｅｎｅｖｅｓｔｉｇａｔｏｒ．ｃｏｍ）预测，??如（图３小１Ａ）所示，Ｏｓ／＾２基因在多种组织中、在不同的干旱处理条件下，??表达均受到显著诱导。为了验证该结果，我们用２０％?ＰＥＧ８０００模拟干旱环境，??对两周大的野生型水稻幼苗进行处理，利用ｑＲＴ－ＰＣＲ?（图３－１－１Ｂ）和ＲＴ－ＰＣＲ??检测Ｏｓ７＾２?（图３－１－１Ｃ）的表达。结果表明，Ｏｓ／＾２基因随着ＰＥＧ处理时间??的增加，表达水平不断上调，并且在２４?ｈ时表达量最高，达到处理前的１１??倍。这些数据说明０ＳＷＫ２可能参与调控水稻对干旱胁迫的适应性。??Ａ?ＯＳ－００２２５?ｄｅｈｙｄｒａｔｉｏｎ?ｓｔｕｄ）?３?（Ｏｈａｇａｄｄｅｓｈｉ．?３ｔｉ｝?／?ｕｎｔｒｅａｔｅｄ?ｓｅｅｄｌｉｎｇ?ｓａｍｐｌｅ?＾?２！?３?ｋ?１１?ｍ?＜〇〇〇’??＾?ＯＳ－００２２５?ｄｅｈｙｄｒａｂｏｎ?ｓｔｕｄｙ?３?（Ｄｈａｇａｄｄｅｓｈｉ．?６ｈ）?／?ｕｎｔｒｅａｔｅｄ?ｓｅｅｄｌｉｎｇ?ｓａｍｐｌｅ?１９?３．ｓｏ?１３?ｗ?＜〇〇〇＇??ＯＳ－００２２５?ｄｅｈｙｄｒａｔｉｏｎ?ｓｔｕｄｙ?３?（ＩＲ２０．３ｈ）?／?ｕｎｔｒｅａｔｅｄ?ｓｅｅｄｉｎｇ?ｓａｍｐｌｅｓ?（ＩＲ２０）?ｔ?８１?＇?９ｉ?３?８Ｓ?？〇〇〇＇??ＯＳ－００２２５?ｄｅｈｙｄｒａｔｉｏｎ?ｓｈｕｔｙ?３?（ＩＲ２０．６ｈ）?＾ｕｎｔｒｅａｔｅｄ?ｓｅｅｄｌｉｎｇ?ｓａｍｐｌｅｓ?（ＩＲ２０
山东大学硕士学位论文??达水平，结果如（图３－１－２Ａ３）所示，Ｏｓ７＾２基因受到ＮａＣｌ的显著诱导，在??２４?ｈ时达到了处理前的１３倍。同时ＲＴ－ＰＣＲ的结果也证明了?Ｏｓ兄Ｏ的诱导情??况（图３－１－２Ｃ）。进一步说明０ｓ／？Ａ：２基因不仅可以对干旱胁迫做出响应，也对??盐响应强烈，０ＳＡＫ２基因在水稻适应非生物胁迫的过程中可能发挥作用。??Ａ?１５?Ｂ??￥?１４－?—??｜?１２＿?■?１５０ｍＭ?ＮａＣｌ??ｉｏ－?■?Ｃｏｎｔｒｏｌ?６ｈ?１２ｈ?２４ｈ??丄■?謹２?—１１！??■?■?Ａｃｔｉｎ??Ｉ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?６ｈ?１２ｈ?２４ｈ??１５０ｍＭ?ＮａＣｌ??图３－１－２?ａｗ？／ｉｒ２基因受盐诱导表达??Ａ：?１５０?ｍＭ?ＮａＣｌ处理２周龄水稻后定量ＰＣＲ检测ａｓ？沿：２的诱导表达水平??Ｂ：?１５０?ｍＭ?ＮａＣｌ处理后的半定量检测结果??１Ｊ仏尺们基因受ＡＢＡ诱导??我们还用ＡＢＡ进行了处理，利用半定量检测Ｏｓ／＾２的表达水平。结果如??（图３－１－３）所示，Ｏｓ／ＪＧ基因经过ＡＢＡ处理之后，在６ｈ条带亮度明显增??强，这说明基因对ＡＢＡ有一定的响应。??Ａ巳Ａ?ｔｒｅａｔｍｅｎｔ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?３ｈ?６ｈ?１２ｈ??ＡＣＴＩＮ?■?ｆ??０ｓＲＫ２【１?１?｜??图３－丨－３?ａ、７？０基因受ＡＢＡ诱导上调??注：ＡＢＡ处理２周龄水稻３?ｈ，?６ｈ，?１２?ｈ后，半定量检测ＣＵ尤２的表达水平??２?转基因植株的获得??２．１水稻过表达植株的获得??２．１．１仍／？反２基因的克隆和中间载体构建??为进一步探宄基因的生物学功能，我们通过
【参考文献】：
期刊论文
[1]茉莉酸甲酯（MeJA）对水稻幼苗的抗旱生理效应[J]. 董桃杏,蔡昆争,张景欣,荣辉,谢国政,曾任森. 生态环境. 2007(04)
本文编号：3613183
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