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马尔尼菲篮状菌Wsc3和MpkA基因功能的初步研究

发布时间:2022-02-11 12:11
  马尔尼菲篮状菌(Talaromyces marneffei,TM)是一种温度诱导双形态真菌,25℃表现为霉菌状,37℃或人体内表现为酵母状,酵母状为其致病相。可感染免疫缺陷人群,尤其是免疫受损严重的HIV阳性患者,能引起严重的播散性马尔尼菲篮状菌病(Talaromyces Marneffei,TSM),若得不到有效治疗,病死率极高。该病区域性流行于东南亚和我国广西,广东,云南,香港等南方地区。其传播途径最常见是经呼吸道吸入马尔尼菲篮状菌孢子导致感染。研究表明从菌丝相到酵母相的形态转变是双相真菌毒性所必需的,该双相形态转换特性与其致病性密切相关,在酵母状态可特异性表达多种毒力因子。马尔尼菲篮状菌它从霉菌相转致病性酵母相的过程中不仅在细胞形态方面发生变化,且在细胞壁的组成成分、抗原分子和毒性的发生等方面也发生改变。但目前其双相转换特性及其致病性的分子机制研究尚不透彻。细胞壁完整性压力应答组分(cell wall integrity and stress response component)Wsc蛋白介导的CWI-MAPK信号通路在真菌细胞对外界环境压力应答中起重要作用。研究表明WSC蛋白... 

【文章来源】:广西医科大学广西壮族自治区

【文章页数】:102 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

马尔尼菲篮状菌Wsc3和MpkA基因功能的初步研究


图1-1细胞壁完整性信号通路??Figure?1-1?Cell?wall?integrity?signaling?pathway??细胞壁应激的转录调控机制,通过DNA微阵列技术和RNA测序技术??

序列,基因,结构域,同源性


马尔尼菲篮状菌Wsc3和MpkA基因功能的初步研究?硕丨■?学位论义??2结果与分析??2.1通过NCB1分析比对马尔尼菲篮状菌Wsc3和MpkA基因蛋白序列??马尔尼菲篮状菌?Wsc3?基因(GenBank?accession?NO.?PMAA_048770)??有一个内含子,编码5%个氨基酸。在39到276位点编码未知功能的区域??(DUF1996),在379到461位点编码与碳水化合物结合有关的WSC结构域??(图1-3)。蛋由同源比对分析得丨1丨:与柄篮状阐(Talaromycesstipitatus,??Ts)的?WSC?蛋白(XP_002481109.1?)同源性为?99%;与烟丨II丨霉(Aspergillus??fumigatus,Af)的WSC蛋A?(OXN06535.1?)同源性为81%;荚膜组织胞??衆菌(///?对op/aw^co/ww/atum)的?WSC?蛋白(XP_001543384.1?)同源性为??57?%?;与巴西副球抱子菌(Paracoccidioides?brasiliensis,Pb)?WSC?蛋白??(EEH23233.1)同源性为?56%;与双相粗抱子球菌(Coccidioides?immitis)??的WSC蛋(XPJ)0丨242584.丨)同源性为55%。马尔尼菲篮状尚WSC域这??个结构域可能与碳水化合物结合有关。??1?101?2(1?3M?4)9?510?5%??I?I?I?I?I?I?I?I?i?I?I?I?I?I?I?I?I?I?I?I?I?I?I?I?I?I?I?II?I?I??Superfanilies???

基因敲除,基因,结构域,载体


?i?i?k?H?k???''j?U?'?\?i??fiTP?binding?sitt?\??山^?1?^??polypeptide?substrate?bir?dir?9???\????^_?‘?\?_??KD1?docking?site?i?\?4?U?4?^??activation?loop?<ft-loop)?4??Specific?hits??Superfanilies?PKc_?1?i?ke?superfam?i?1?y??图1-4?MPKA基因保守结构域??Figure?1-4?Conserved?domains?on?MpkA?gene??2.2马尔尼菲篮状菌Wsc3和MpkA基因敲除载体的构建??2.2.1?Wsc3和MpkA基因侧翼DNA片段PCR扩增??以野生菌株FRR2161DNA为模板,以Wsc3和MpkA的??S1F/S1R-LK2,S5F-LK1/S5R为引物扩增S1和S5基因片段,扩增出Wsc3-Sl??基因片段大小为2043bp,Wsc3-S5基因片段大小为2394bp;?MpkA-Sl基因??片段大小为2263bp,MpkA-S5基因片段大小为2125bp。同时以质粒??pLAX-233DNA?为模板,以?LlloxpyrGF/?L21oxpyrGR?为引物,扩増??LloxpyrGloxL片段,此片段大小为1503bp。将以上扩增出的DNA片段经??1%琼脂糖凝胶电泳检测(如图1-5)。??44??

【参考文献】:
期刊论文
[1]生活垃圾处理技术的初步探讨[J]. 艾碧英,张俊,叶玮.  科技信息(科学教研). 2008(20)



本文编号:3620256

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