转AlaAT基因小黑杨对氮素的响应
发布时间：2022-02-24 01:40
小黑杨（Populus simonii×Popuulus nigra）具有抗旱、耐寒等多种优良性状,是北方造林所推广的树种。氮素是植物生长发育过程中必须的营养元素,丙氨酸氨基转移酶（AlaAT）是氮素同化的关键酶,该酶广泛的分布在各种植物的组织和器官中,它的酶活不仅发现在叶、根和花中,而且在其他组织像是水果和水稻种子的胚乳组织中也有发现。AlaAT分布的广泛也证明了它在植物整个生命周期的新陈代谢中发挥着重要的作用。本实验以转AlaAT基因小黑杨为试验材料,通过对小黑杨生长指标和生理指标的检测,探究AlaAT在杨树氮代谢中的作用,主要研究结果如下:（1）为探究转AlaAT基因小黑杨是否在表型上与野生型小黑杨有差异,检测了17个转基因株系和野生型植株在生长了两个月后的株高与地径两种生长指标以及光合指标,发现大部分转基因株系的株高与地径增量优于野生型植株,其中3号和7号转基因植株株高增量最大,2号和6号转基因植株地径增量与野生型植株相比达到极显著差异,且所有转基因株系的地径增量都高于野生型植株。光合指标的检测中,1号转基因植株的净光合速率高于野生型植株,其他转基因株系的净光合速率、气孔导度和...
【文章来源】：东北林业大学黑龙江省211工程院校教育部直属院校
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
1.1 植物对氮素吸收利用的研究进展
1.1.1 氮素对植物生长发育的影响
1.1.2 植物对氮素吸收的生理机制和分子机制
1.2 植物氮代谢中参与的酶类
1.3 AlaAT基因的发现及功能
1.4 转基因杨树的研究进展
1.5 研究的目的意义
2 转AlaAT基因小黑杨生长指标及光合指标结果分析
2.1 试验材料
2.1.1 植物材料
2.1.2 小黑杨扩繁方法
2.1.3 小黑杨扩繁主要培养基及配方
2.1.4 外植体消毒和小黑杨扩繁
2.2 试验方法
2.2.1 小黑杨材料的筛选及培养
2.2.2 小黑杨植株株高检测
2.2.3 小黑杨植株地径检测
2.2.4 小黑杨光合指标检测
2.3 试验结果
2.3.1 转AlaAT基因小黑杨株高增量结果分析
2.3.2 转AlaAT基因小黑杨地径增量结果分析
2.3.3 转AlaAT基因小黑杨株高增量差异分析
2.3.4 转AlaAT基因小黑杨地径增量差异分析
2.3.5 转AlaAT基因小黑杨光合测定结果分析
2.4 讨论
2.5 本章小结
3 转AlaAT基因小黑杨谷丙转氨酶酶活结果分析
3.1 试验材料
3.1.1 植物材料
3.1.2 试验所用试剂盒
3.2 试验方法
3.2.1 植物材料处理方法
3.2.2 丙氨酸氨基转移酶酶活测定
3.3 试验结果
3.4 本章小结
4. 转基因小黑杨植株在不同氮素处理后生理指标检测
4.1 试验材料
4.2 方法
4.2.1 材料的准备
4.2.2 试验主要处理营养液浓度及成分
4.2.3 谷氨酰胺合成酶(GS)的酶活测定
4.2.4 谷氨酸合成酶(GOGAT)的酶活测定
4.3 试验结果
4.3.1 NaNO_3处理转AlaAT基因小黑杨GS酶活测定结果分析
4.3.2 NH_4Cl处理转AlaAT基因小黑杨GS酶活测定结果分析
4.3.3 NaNO_3处理转AlaAT基因小黑杨GOGAT酶活测定结果分析
4.3.4 NH_4Cl处理转AlaAT基因小黑杨GOGAT酶活测定结果分析
4.4 本章小结
5. 氮同化相关基因表达模式分析
5.1 材料
5.2 万法
5.2.1 试验材料的处理及收样
5.2.2 小黑杨总RNA的提取
5.2.3 反转录
5.2.4 实时荧光定量PCR分析
5.3 试验结果
5.3.1 不同浓度铵态氮与硝态氮处理后转基因植株中AlaAT1基因表达量
5.3.2 不同浓度铵态氮与硝态氮处理后转基因植株中AlaAT3基因表达量
5.3.3 不同浓度铵态氮与硝态氮处理后转基因植株中AlaAT4基因表达量
5.3.4 不同浓度铵态氮与硝态氮处理后转基因植株中AspAT基因表达量
5.3.5 不同浓度铵态氮与硝态氮处理后转基因植株中GS1基因表达量
5.3.6 不同浓度铵态氮与硝态氮处理后转基因植株中GS2基因表达量
5.3.7 不同浓度铵态氮与硝态氮处理后转基因植株中NR基因表达量
5.3.8 不同浓度铵态氮与硝态氮处理后转基因植株中NADH-GOGAT基因表达量
5.3.9 不同浓度铵态氮与硝态氮处理后转基因植株中NlR基因表达量
5.3.10 不同浓度铵态氮与硝态氮处理后转基因植株中NRT1.1基因表达量
5.4 本章小结
结论
参考文献
附录
攻读学位期间发表的学术论文
致谢
本文编号：3641712
【文章来源】：东北林业大学黑龙江省211工程院校教育部直属院校
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
1.1 植物对氮素吸收利用的研究进展
1.1.1 氮素对植物生长发育的影响
1.1.2 植物对氮素吸收的生理机制和分子机制
1.2 植物氮代谢中参与的酶类
1.3 AlaAT基因的发现及功能
1.4 转基因杨树的研究进展
1.5 研究的目的意义
2 转AlaAT基因小黑杨生长指标及光合指标结果分析
2.1 试验材料
2.1.1 植物材料
2.1.2 小黑杨扩繁方法
2.1.3 小黑杨扩繁主要培养基及配方
2.1.4 外植体消毒和小黑杨扩繁
2.2 试验方法
2.2.1 小黑杨材料的筛选及培养
2.2.2 小黑杨植株株高检测
2.2.3 小黑杨植株地径检测
2.2.4 小黑杨光合指标检测
2.3 试验结果
2.3.1 转AlaAT基因小黑杨株高增量结果分析
2.3.2 转AlaAT基因小黑杨地径增量结果分析
2.3.3 转AlaAT基因小黑杨株高增量差异分析
2.3.4 转AlaAT基因小黑杨地径增量差异分析
2.3.5 转AlaAT基因小黑杨光合测定结果分析
2.4 讨论
2.5 本章小结
3 转AlaAT基因小黑杨谷丙转氨酶酶活结果分析
3.1 试验材料
3.1.1 植物材料
3.1.2 试验所用试剂盒
3.2 试验方法
3.2.1 植物材料处理方法
3.2.2 丙氨酸氨基转移酶酶活测定
3.3 试验结果
3.4 本章小结
4. 转基因小黑杨植株在不同氮素处理后生理指标检测
4.1 试验材料
4.2 方法
4.2.1 材料的准备
4.2.2 试验主要处理营养液浓度及成分
4.2.3 谷氨酰胺合成酶(GS)的酶活测定
4.2.4 谷氨酸合成酶(GOGAT)的酶活测定
4.3 试验结果
4.3.1 NaNO_3处理转AlaAT基因小黑杨GS酶活测定结果分析
4.3.2 NH_4Cl处理转AlaAT基因小黑杨GS酶活测定结果分析
4.3.3 NaNO_3处理转AlaAT基因小黑杨GOGAT酶活测定结果分析
4.3.4 NH_4Cl处理转AlaAT基因小黑杨GOGAT酶活测定结果分析
4.4 本章小结
5. 氮同化相关基因表达模式分析
5.1 材料
5.2 万法
5.2.1 试验材料的处理及收样
5.2.2 小黑杨总RNA的提取
5.2.3 反转录
5.2.4 实时荧光定量PCR分析
5.3 试验结果
5.3.1 不同浓度铵态氮与硝态氮处理后转基因植株中AlaAT1基因表达量
5.3.2 不同浓度铵态氮与硝态氮处理后转基因植株中AlaAT3基因表达量
5.3.3 不同浓度铵态氮与硝态氮处理后转基因植株中AlaAT4基因表达量
5.3.4 不同浓度铵态氮与硝态氮处理后转基因植株中AspAT基因表达量
5.3.5 不同浓度铵态氮与硝态氮处理后转基因植株中GS1基因表达量
5.3.6 不同浓度铵态氮与硝态氮处理后转基因植株中GS2基因表达量
5.3.7 不同浓度铵态氮与硝态氮处理后转基因植株中NR基因表达量
5.3.8 不同浓度铵态氮与硝态氮处理后转基因植株中NADH-GOGAT基因表达量
5.3.9 不同浓度铵态氮与硝态氮处理后转基因植株中NlR基因表达量
5.3.10 不同浓度铵态氮与硝态氮处理后转基因植株中NRT1.1基因表达量
5.4 本章小结
结论
参考文献
附录
攻读学位期间发表的学术论文
致谢
本文编号：3641712
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