利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建Ndufs4基因敲除小鼠和STRA8-eGFP转基因小鼠的研究

发布时间：2022-02-24 02:22

　　动物模型是生命科学领域研究使用的重要工具之一,由于存在多种CRE工具鼠可以方便实现条件性敲除等优势,小鼠受到研究者们的青睐。随着基因编辑技术的快速发展,将其运用于各种细胞系和动物中的研究与日俱增。其中,最受瞩目的基因编辑技术是CRISPR/Cas9（规律成簇的间隔短回文重复/CRISPR相关蛋白9）系统,它具有设计简单、效率高等优势。因此,本论文利用该系统开展了以下两方面的研究工作:首先,我们利用CRISPR/Cas9系统获得了 Ndufs4基因敲除小鼠。临床研究发现在多例亚急性坏死性脑脊髓病（Leigh Syndrome,LS）病人中存在Ndufs4基因突变,我们研究发现敲除小鼠的运动能力比野生型小鼠显著低下,该表型与LS病人类似。我们进一步发现,敲除小鼠3周出现脱毛的现象,体重比野生型小鼠轻,大多数小鼠活不到成年,幸存的小鼠生殖能力弱,无法自然交配获得子代,随后的切片染色显示敲除小鼠的卵巢中能见各级卵母细胞,睾丸中能见成熟精子,其后我们使用了胞浆内单精子注射法（Intracytoplasmic sperm injection,ICSI）发现纯和敲除小鼠的子代在早期胚胎发育过程中受到... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
    1.1 基因编辑技术简介
        1.1.1 CRISPR/Cas9系统简介
        1.1.2 基因敲入技术简介
        1.1.3 转基因动物的发展
    1.2 Ndufs4基因简介
    1.3 Stra8基因简介
第二章 实验结果
    2.1 材料和方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 结果与分析
        2.2.1 Ndufs4基因敲除小鼠的建立及研究
        2.2.2 建立STRA8-eGFP小鼠模型
第三章 总结与展望
参考文献
附录
    一 实验中使用的引物
    二 英文简写全称
致谢



本文编号：3641777