基于金微电极检测TP53基因和ATP的电化学生物传感器研究

发布时间：2022-04-27 19:00

　　细胞是生物体结构和功能的基本单元。分析单个细胞内的基因、小分子和蛋白质等,有助于了解细胞的新陈代谢、信号传导等现象,对揭示生命活动规律及肿瘤疾病的早期诊断、预防和治疗具有重要意义。因此,建立简单、灵敏、快速检测单细胞中基因、小分子等物质的检测成为生命分析领域重要的研究课题。目前用于单细胞分析的技术和方法有显微分析及显微操作技术、流式细胞术、荧光分析技术、光镊技术、活细胞探针、数字成像技术及其相关联用技术,并且发展迅速。一些传统的方法或存在取样体积大、分析时间长及灵敏度低等缺点,难以适用于单细胞的分析,且获取单个细胞中生物分子化学信息的检测方法有限。电化学方法因其设备简单,不需要使用探针对目标进行标记,很大程度上减小了对细胞正常生理机能的扰动。同时,由于收集电化学信号无需受到光学衍射极限的限制,单细胞电化学分析方法不需要以时间分辨率为代价实现高空间分辨率。制备微电极能力以及纳米电化学理论快速发展,显著提高了电化学测量的检测极限、特异性和分辨率。因此,电化学分析方法成为正在迅速发展的单细胞分析方法。本论文的研究目的是制备新型的金微电极电化学生物传感器,建立对TP53基因的检测及亚细胞水平上... 

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 微电极
        1.1.1 微电极的概述
        1.1.2 微电极的分类
        1.1.3 微电极的特性
        1.1.4 微电极的制备及应用
    1.2 单细胞分析
        1.2.1 单细胞分析的概述
        1.2.2 单细胞分析的特点
        1.2.3 单细胞分析检测方法
    1.3 基于微电极的单细胞电化学传感器研究进展
    1.4 本论文研究目的及研究内容
第二章 基于金微电极检测TP53基因的电化学传感器
    2.1 引言
    2.2 实验部分
        2.2.1 实验试剂与仪器
        2.2.2 微电极的制备
        2.2.3 电化学生物传感器的构建
        2.2.4 电化学测量方法
        2.2.5 细胞样品处理
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 金微电极的表征
        2.3.2 电化学生物传感器用于TP53检测的可行性分析
        2.3.3 条件优化
        2.3.4 电化学生物传感器检测TP53基因的分析性能
        2.3.5 实际样品的检测
    2.4 结论
第三章 实时原位分析单细胞内ATP分布和含量的电化学传感器
    3.1 引言
    3.2 实验部分
        3.2.1 实验试剂与仪器
        3.2.2 电化学生物传感器的制备
        3.2.3细胞活力实验
        3.2.4 电化学测量方法
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 金微电极的表征
        3.3.2 电化学生物传感器的分析特性
        3.3.3 亚细胞水平检测ATP的可行性分析
        3.3.4 单个活细胞内ATP分布和含量的检测
        3.3.5 饥饿状态下细胞内ATP分布和含量的监测
        3.3.6 Ca~(2+)诱导下细胞内ATP分布和含量的监测
        3.3.7 单个活细胞内ATP分布和含量的检测(PBS浴中)
        3.3.8 饥饿状态与Ca~(2+)诱导下细胞内ATP的检测(PBS浴中)
    3.4 结论
总结
参考文献
致谢
攻读硕士研究生期间的研究成果



本文编号：3649002