GSDMD基因敲除对内毒素所致小鼠急性肺损伤的保护作用

发布时间：2022-04-28 22:20

　　目的探讨GSDMD基因对内毒素所致小鼠急性肺损伤（ALI）的作用。方法 20只野生型C57BL/6小鼠和20只GSDMD基因敲除C57BL/6小鼠随机分为野生型对照组（WT-sham组）、野生型ALI组（WT-ALI组）、基因敲除型对照组（KO-sham组）及基因敲除型ALI组（KO-ALI组）,每组10只。ALI组经气管滴入1 mg/kg脂多糖（LPS）制备小鼠ALI模型,对照组气管滴入等体积的PBS溶液。造模成功后取肺组织和肺泡灌洗液（BALF）。肺组织行HE染色,光镜下完成肺损伤半定量评分,并测量肺组织湿/干重比（W/D）;采用BCA法检测BALF中总蛋白含量,ELISA法检测BALF中TNF-α、IL-1β和IL-6水平;Western blotting检测BALF和肺组织中焦亡相关蛋白的表达。结果与WT-ALI组相比,KO-ALI组小鼠肺损伤半定量评分及肺组织W/D均明显降低（P<0.01）,BALF中总蛋白含量以及TNF-α、IL-1β、IL-6水平亦明显降低（P<0.05或P<0.01）。基因敲除型小鼠未见GSDMD蛋白的表达和活化。野生型小鼠和基因敲除... 

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1　主要试剂及仪器
    1.2 实验动物及分组
    1.3 小鼠ALI模型制备
    1.4 标本采集
        1.4.1 肺组织病理学观察及肺损伤严重程度评价
        1.4.2 收集BALF
            1.4.2.1 ELISA法测定BALF中TNF-α、IL-6及IL-1β水平
            1.4.2.2 BCA法测定BALF中总蛋白含量
        1.4.3 测量肺组织W/D
    1.5 Western blotting检测焦亡相关蛋白表达
    1.6 统计学处理
2 结 果
    2.1　各组小鼠肺组织病理学检测及肺损伤半定量评分结果比较
    2.2 各组小鼠肺组织W/D比较
    2.3 各组小鼠BALF中总蛋白含量比较
    2.4 各组小鼠BALF中TNF-α、IL-1β、IL-6的水平比较
    2.5 各组小鼠BALF及肺组织中焦亡相关蛋白的表达
3 讨 论


【参考文献】：
期刊论文
[1]Gasdermin D蛋白对内毒素导致肺泡巨噬细胞焦亡的影响[J]. 帅维正,李军,陈旭昕,李大伟,张志成.  中华肺部疾病杂志(电子版). 2020(04)
[2]NLRP3炎性小体——急性肺损伤的发病核心[J]. 罗亚岚,许才明,李兆霞,蒋柳,陈海龙.  中国急救医学. 2019 (03)
[3]不同机械通气潮气量对肺损伤影响研究[J]. 白杨,刘尚典.  创伤与急危重病医学. 2018(06)
[4]乌司他丁在脂多糖/尼日利亚菌素诱导的巨噬细胞焦亡中的作用[J]. 周俊杰,吴实正,段鹏凯,袁媛,何璇,童华生.  解放军医学杂志. 2018(07)
[5]不同无创通气模式治疗急性心源性肺水肿临床疗效观察[J]. 李力,王朝晖,殷明伟.  创伤与急危重病医学. 2018(03)
[6]LPS直接及间接作用致小鼠急性肺损伤模型的建立[J]. 陈英华,吕嘉文,翟启良,谢哲凡,胡国栋.  中国临床解剖学杂志. 2015(04)
[7]气管滴注法与雾化吸入法建立小鼠急性肺损伤模型及其效果比较[J]. 苑少欣,孔雅娴,李蕊,刘三海,朱安妮,乔艳雪,张剑平.  中华实验和临床感染病杂志(电子版). 2014(02)



本文编号：3649648