多重实时PCR和测序技术用于RHC基因分型的研究

发布时间：2022-08-09 10:14

　　目的探讨多重实时PCR和测序技术用于RHC基因分型的可行性。方法随机收集2019年11月2日—11月6日期间242名健康献血者血样。使用血清学方法检测标本的Rh CcEe血型表型。使用检测RHCE基因第1外显子48C>G多态性及第2内含子109 bp插入序列的多重实时PCR方法对血液标本进行RHC基因分型。使用基因测序方法对以上2个多态性位点检测结果不一致的标本进行基因分型。结果经多重实时PCR基因分型,2个多态性位点分型结果一致者共235例（97.10%）,这些标本的分型结果和血清学方法是完全一致的。2个多态性位点分型结果不一致者共7例（2.90%）,其中第1外显子48C>G多态性位点分型结果与血清学方法不符者共4例,假阳性率12.5%（4/32）,而第2内含子的109 bp插入序列分型结果与血清学方法不符者共3例,假阴性率1.43%（3/210）。对于多重实时PCR2个多态性位点分型不一致的标本,进行第2外显子测序,测序结果和血清学完全一致。结论使用检测RHCE基因第1外显子48C>G多态性及第2内含子109 bp插入片段的多重实时PCR进行RHC基因分型,若二者... 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 随机选取
    1.2 仪器及试剂
    1.3 血清学方法
    1.4 DNA的提取
    1.5 引物及探针设计及合成
    1.6 多重实时PCR
    1.7 RHCE基因第2外显子测序分析
2 结果
    2.1 血清学分型结果
    2.2 多重实时PCR基因分型结果
    2.3 RHCE基因分型结果与血清学分型结果比较
    2.4 RHCE基因第2外显子基因测序结果
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]简易RHCE基因定型方法用于Rh配型输血的可行性探讨[J]. 党鑫堂,伍昌林,徐华,李岚,朱奕,吴筱莹,张印则,易品,余志英,邵超鹏.  中国输血杂志. 2018(11)
[2]46346名患者不规则抗体筛查结果及分析[J]. 王钰箐,蔡晓红,龚淞颂,邹纬,刘志刚,王勤,沙青,沈敏,叶瑾,王学锋.  中国输血杂志. 2015(08)
[3]中国南方汉族和西藏藏族RHCE基因109bp插入序列和733C>G多态性研究[J]. 石文,李慧,张印则,李晓娟,刘持翔,斯郎则仁,余明明,王淑红,闫清雅,徐华,周华友.  中国输血杂志. 2013(10)
[4]RhCE抗原基因分型和表型不一致与等位基因变异的相关性研究[J]. 王志红,兰炯采.  中国输血杂志. 2012(11)
[5]RHCE基因结构研究[J]. 兰炯采,周华友,庞桂芝,杨全科,吴灿.  中国输血杂志. 2005(05)



本文编号：3672371