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斑节对虾CFSH基因的克隆及其多功能性探究

发布时间:2022-10-04 12:47
  该研究通过RACE (Rapid-amplification of cDNA ends)法克隆并获得斑节对虾(Penaeus monodon)甲壳动物雌性激素(Crustacean female sex hormone, CFSH)基因PmCFSH的开放阅读框(ORF)及3’非编码区(UTR),预测编码214氨基酸(aa)的蛋白,其含有信号肽和1个与免疫应答相关的白介素17E (IL-17E)结构域。qRT-PCR结果显示,PmCFSH基因在各个组织中均有表达,其中在腹神经组织中的表达量最高;从受精卵时期到仔虾期的表达量呈逐渐上升趋势,其中在仔虾期表达量最高;在卵巢发育Ⅱ—Ⅳ期,随卵巢发育成熟表达量逐渐升高;革兰氏阴性菌和阳性菌均能上调PmCFSH基因的表达量,其中鳃组织PmCFSH在哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)感染后第3小时和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)刺激后第12小时达到表达高峰;而肝胰腺PmCFSH在哈维氏弧菌感染后第3小时和金黄色葡萄球菌刺激后第48小时达到表达高峰。研究表明,PmCFSH基因不仅参与幼体发育以及性腺成熟的调控,对细... 

【文章页数】:10 页

【文章目录】:
1 材料与方法
    1.1 实验材料
    1.2 总RNA的提取与cDNA的合成
    1.3 PmCFSH基因的克隆
    1.4 PmCFSH基因的序列分析
    1.5 PmCFSH基因在不同组织中的表达
    1.6 PmCFSH基因在不同发育期的表达
    1.7 PmCFSH基因在卵巢不同发育阶段的表达
    1.8 PmCFSH基因在不同细菌刺激下的表达
    1.9 统计学分析
2 结果
    2.1 PmCFSH基因的cDNA序列特征
    2.2 同源性和系统进化树分析
    2.3 PmCFSH的结构域和蛋白质三维结构分析
    2.4 PmCFSH基因在不同组织中的表达情况
    2.5 PmCFSH在不同发育阶段的表达分析
    2.6 PmCFSH在卵巢不同发育阶段的表达分析
    2.7 PmCFSH在不同细菌刺激下的表达
3 讨论
    3.1 PmCFSH序列分析
    3.2 PmCFSH的组织表达和应激应答
    3.3 PmCFSH在不同胚胎发育时期及卵巢发育时期的表达


【参考文献】:
期刊论文
[1]斑节对虾Pellino基因的克隆及其在不同胁迫条件下的表达分析[J]. 丁阳阳,江世贵,李运东,杨其彬,姜松,杨丽诗,黄建华,周发林.  南方水产科学. 2019(03)
[2]非洲斑节对虾健康养殖技术[J]. 许成团,方良智.  海洋与渔业. 2016(06)
[3]促性腺激素释放激素及多巴胺拮抗物地欧酮对斑节对虾卵巢组织发育的影响[J]. 韩萍,杨丽诗,吴松,杨其彬,黄建华,周发林,江世贵.  南方水产科学. 2015(02)
[4]中国明对虾卵黄蛋白原基因启动子克隆与分析[J]. 谢松,李理想,陈宏健,孙玲玲,柳峰松.  河北大学学报(自然科学版). 2013(02)
[5]中国明对虾脑发生和分化的细胞学观察[J]. 张健,张志峰,邵明瑜.  中国水产科学. 2007(01)
[6]南海北部斑节对虾卵巢发育的形态及组织学观察[J]. 黄建华,周发林,马之明,叶乐,江世贵.  热带海洋学报. 2006(03)



本文编号:3685055

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