LNK基因表达改变对THP-1细胞增殖及凋亡的影响

发布时间：2022-10-04 22:44

　　目的初步探讨沉默及过表达LNK基因后对人急性单核细胞白血病细胞（THP-1）增殖及凋亡的影响,为研究白血病靶向治疗提供新方向。方法实验分为4组:沉默LNK组（Si-LNK）、过表达LNK组（VP-LNK）、空转组（Empty virus group）及对照组（Control group）。慢病毒转染THP-1细胞,建立稳定沉默及过表达LNK基因细胞株;转染72 h后,观察沉默LNK组、过表达LNK组及空转组绿色荧光蛋白（GFP）的表达量,流式细胞仪检测慢病毒感染效率;RT-PCR及Western blot检测LNK基因mRNA和蛋白表达水平;CCK-8法检测THP-1细胞在24、48、72 h的增殖情况,流式细胞术检测THP-1细胞凋亡率。结果经慢病毒感染72 h,沉默LNK组、过表达LNK组及空转组THP-1细胞的感染效率在99%以上。与对照组相比,沉默组LNK基因的mRNA水平及蛋白表达水平均显著降低,而过表达组均显著升高,说明LNK基因沉默或过表达成功。CCK-8法及流式检测结果显示沉默LNK组较对照组细胞增殖活性降低,且细胞凋亡率明显增高,差异均有统计学意义（P＜0.05）;与... 

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验材料
    1.2 主要试剂及仪器
    1.3 THP-1细胞复苏及培养
    1.4 慢病毒感染THP-1细胞
    1.5 流式细胞术检测细胞感染效率
    1.6 RT-PCR检测LNK基因mRNA水平
    1.7 Western Blot 检测LNK基因蛋白水平
    1.8 CCK-8法检测细胞增殖
    1.9 流式细胞术检测细胞凋亡
    1.10 统计学处理
2 结果
    2.1 慢病毒感染THP-1细胞72h的绿色荧光表达量
    2.2 慢病毒感染THP-1细胞的感染效率
    2.3 各组THP-1细胞株LNK基因mRNA表达水平
    2.4 Western blot各组THP-1细胞株LNK蛋白水平
    2.5 沉默及过表达LNK基因对THP-1细胞增殖的影响
    2.6 沉默及过表达LNK基因对THP-1细胞凋亡的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]LNK基因沉默对THP-1细胞EPO、EPOR表达影响的研究[J]. 田润梅,罗茜,谭梅,史良,黄成双,苏琼,陈艳.  中国实验血液学杂志. 2019(04)
[2]LNK基因在急性白血病患者中的表达及临床意义[J]. 罗茜,谭梅,吴柳松,田润梅,容颖,苏琼,朱平,陈艳.  中国实验血液学杂志. 2018(02)
[3]LNK基因在慢性髓系白血病中的变异[J]. 谭梅,容颖,田润梅,杨宇航,朱平,陈艳.  中国实验血液学杂志. 2017(03)
[4]白血病相关基因MLAA-34与急性单核细胞白血病相关性探讨[J]. 张鹏宇,罗静,赵璇,张龙进,雷博,蒙欣,田玮,陈银霞,张王刚.  陕西医学杂志. 2016(10)
[5]急性单核细胞白血病各亚型（M5a和M5b）免疫分型和细胞遗传学及临床特点分析[J]. 贺敏慧,陈芳,张男,胡延平,张旻昱,张继红.  现代肿瘤医学. 2013(11)
[6]急性单核细胞白血病预后因素研究进展[J]. 胡昳歆,仇红霞.  国际输血及血液学杂志. 2012 (01)



本文编号：3685897