食管鳞癌细胞内多信号传导通路参与PD-L1基因表达调控的研究

发布时间：2022-10-19 13:47

　　目的:研究食管鳞癌Eca109细胞中,Survivin是否参与TNF-α诱导PD-L1表达增高,初步确定与PD-L1表达相关的信号通路;明确以上信号通路蛋白细胞外泌体中含量的变化。方法:1)选用肿瘤坏死因子α（TNF-α）诱导食管鳞癌细胞Eca109,使PD-L1表达增高;2)通过ERK、MEK、JNK、PI3K/AKT、STAT3、PKA、PKC、Hedgehog、CaMK2信号通路抑制剂SCH772984、PD98059、SP600125、LY294002、AG490、H89、Staurosporine、Vismodegib、KN62干预Eca109细胞1.5、3、6、12、24小时,筛选TNF-α诱导PD-L1高表达的主要细胞内信号传导通路;3)使用Flag-Survivin过表达载体、Survivin的抑制剂YM155及筛选的主要信号传导通路抑制剂对Eca109细胞进行干预3、12、24小时;4)收集不同处理组中的细胞培养基上清,采用超高速离心法提取外泌体。本实验中选用免疫印迹Western blot蛋白电泳方法检测抑制剂干预后相关信号通路的相关基因ERK、MEK、JNK、PI... 

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中英文缩略词对照表
摘要
Abstract
前言
研究内容与方法
    1 实验材料及设备
        1.1 实验材料
        1.2 试剂设备
    2 实验方法
        2.1 细胞实验
        2.2 感受态细菌转化
        2.3 质粒抽提
        2.4 脂质体电转染
        2.5 PD-L1 高表达模型建立
        2.6 细胞凋亡
        2.7 免疫印迹(Western blot)
        2.8 外泌体的提取
    3 质量控制
        3.1 样本控制
        3.2 实验技术
        3.3 仪器质控
    4 统计方法
    5 技术路线
结果
讨论
小结
致谢
参考文献
综述
    参考文献
攻读硕士学位期间发表的论文
导师评阅表


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3693475