β4GalT1基因点突变为GalNAcT对小鼠生理功能的影响

发布时间：2022-10-22 19:20

　　[目的]本文旨在研究β-1,4-半乳糖基转移酶1基因（β4GalT1）突变为N-乙酰氨基半乳糖转移酶基因（GalNAcT）对小鼠生理功能的影响。[方法]以β4GalT1基因点突变的纯合子、杂合子和野生型小鼠为研究对象,观察、测定和记录小鼠的日常状态与繁殖情况,并采用单因素方差分析和多重比较对数据进行差异显著性分析,研究β4GalT1基因点突变为GalNAcT基因对小鼠生长发育、神经系统发育和雌小鼠繁殖能力的影响。以纯合子和野生型小鼠为研究对象,探讨β4GalT1基因点突变对小鼠肝脏中蛋白质糖基化的影响。[结果]通过对比不同周龄的纯合子和野生型小鼠的体质量和成年小鼠的主要器官质量,发现β4GalT1基因点突变对小鼠体质量和主要器官质量均无显著影响。通过对纯合子和野生型小鼠肝脏中N-链寡糖的比较可知,β4GalT1基因点突变改变了小鼠肝脏中N-链寡糖的结构。观察纯合子和野生型小鼠日常状态发现,纯合子小鼠比野生型小鼠反应迟滞,对外界刺激反应不敏感。通过悬尾试验,发现纯合子小鼠的静止时间极显著长于野生型小鼠（P＜0.01）。对3种基因型小鼠进行亲本自交,发现纯合子雌小鼠受孕困难,或者受孕以后不... 

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料和试剂
    1.2 β4GalT1基因点突变小鼠的设计
    1.3 动物饲养
    1.4 β4GalT1基因点突变小鼠基因型鉴定
        1.4.1 样品采集及鼠尾基因组DNA的提取
        1.4.2 β4GalT1基因点突变小鼠基因型的鉴定
    1.5 β4GalT1基因点突变小鼠的繁殖、行为学分析及器官质量测定
        1.5.1 β4GalT1基因点突变小鼠的繁殖
        1.5.2 β4GalT1基因点突变小鼠的形态和行为
        1.5.3 β4GalT1基因点突变小鼠的器官质量
        1.5.4 统计分析
    1.6 β4GalT1基因点突变对小鼠肝脏中糖基化的影响
        1.6.1 小鼠肝脏样品的处理
        1.6.2 小鼠肝脏中N-链寡糖的制备
            1)肝脏的前处理:
            2)N-链寡糖的酶解释放:
            3)N-链寡糖的纯化:
        1.6.3 小鼠肝脏N-链寡糖的高效液相色谱(UPLC)检测
2 结果与分析
    2.1 小鼠基因型的鉴定
        2.1.1 PCR鉴定小鼠基因型
        2.1.2 不同基因型小鼠肝脏中N-链寡糖的比较
    2.2 β4GalT1基因点突变对小鼠的生长发育、行为及雌小鼠繁殖能力的影响
        2.2.1 β4GalT1基因点突变对小鼠生长发育的影响
        2.2.2 β4GalT1基因点突变对小鼠行为的影响
        2.2.3 β4GalT1基因点突变对雌小鼠繁殖能力的影响
3 讨论与结论


【参考文献】：
期刊论文
[1]肝脏功能的检测方法分类及研究现状[J]. 李婷.  肝脏. 2019(08)
[2]β1,4半乳糖基转移酶的生物学功能研究进展[J]. 李淑芬,李希.  生命的化学. 2016(05)



本文编号：3696719