UGTs基因多态性与Exemestane和NNAL代谢的关联性研究

发布时间：2022-12-04 12:40

　　二相结合反应是内源和外源化合物进行生物转化的重要步骤。负责二相结合反应的代谢酶主要包括尿苷二磷酸-葡萄糖醛酸转移酶（UDP-glucuronosyltransferases,UGTs）,硫酸基转移酶（sulfotransferases,SULTs）,N-乙酰基转移酶（N-acetyltransferases,NATs）,谷胱甘肽巯基转移酶（glutathione S-transferases,GSTs）和甲基转移酶（methyltransferases）。二相代谢酶中UGTs催化内源和外源化合物的葡糖苷酸化,GSTs催化内源的三肽谷胱甘肽（GSH）与外源性化合物结合形成谷胧甘肽结合物。Exemestane（EXE）是一种芳香酶抑制剂,被广泛用于乳腺癌的治疗和预防。已知的EXE的主要代谢途径是EXE首先被还原形成具有活性的17β-dihydro-EXE（17β-DHE）,随后 17β-DHE 经葡糖苷酸化形成17β-hydroxy-EXE-17-0-β-D-glucuronide（17β-DHE-Gluc）。先前的体外研究发现UGT2B17是催化17β-DHE-Gluc形成的主要酶。为了... 

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【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
1 绪论
    1.1 二相代谢酶
        1.1.1 尿苷二磷酸-葡萄糖醛酸转移酶
        1.1.2 谷胱甘肽巯基转移酶
        1.1.3 硫酸基转移酶
        1.1.4 N-乙酰基转移酶
        1.1.5 甲基转移酶
    1.2 基因型检测
        1.2.1 单核苷酸多态性(SNP)
        1.2.2 基因拷贝数变异(CNV)
    1.3 Exemestane
        1.3.1 乳腺癌及其治疗
        1.3.2 芳香酶抑制剂及Exemestane
        1.3.3 Exemestane的代谢途径
        1.3.4 MAP.3
    1.4 NNAL
        1.4.1 烟草致癌物与肺癌
        1.4.2 NNAL的代谢途径
2 UGT2B17基因多态性与Exemestane代谢关联性研究
    2.1 实验材料及方法
        2.1.1 化学药品及材料
        2.1.2 研究对象和样品
        2.1.3 样品制备
        2.1.4 超高效液相色谱串联质谱条件
        2.1.5 尿液中肌酸酐的测定
        2.1.6 UGT2B17基因型检测
        2.1.7 数据分析
    2.2 结果
        2.2.1 尿液和血浆中Exemestane及其代谢产物的浓度
        2.2.2 UGT2817基因型分布
        2.2.3 UGT2B17基因型与尿液和血浆样品中Exemestane及其代谢产物的浓度间的联系
    2.3 讨论
        2.3.1 尿液和血浆中Exemestane及其代谢产物的浓度
        2.3.2 UGT2B17基因缺失在不同种族中的差异
        2.3.3 UPLC/MS方法中的检测限和定量限
        2.3.4 取样时间和取样类型
        2.3.5 潜在的Exemestane代谢产物及代谢途径
    2.4 本章小结
3 体内新的Exemestane代谢产物的鉴定和定量
    3.1 实验材料及方法
        3.1.1 化学药品及材料
        3.1.2 研究对象和样品
        3.1.3 基因组DNA提取和UGT2B17,GSTM1和GSTT1的基因型检测
        3.1.4 新的Exemestane代谢产物鉴定中的样品制备
        3.1.5 新的Exemestane代谢产物鉴定中的UPLC/MS方法
        3.1.6 EXE-cysteine和17β-DHE-cysteine的化学合成
        3.1.7 EXE-cysteine和17β-DHE-cysteine及相应内标的生物合成方法
        3.1.8 新的Exemestane代谢产物定量分析中的样品制备
        3.1.9 新的Exemestane代谢产物定量分析中的UPLC/MS方法
        3.1.10 尿液中肌酸酐含量的测定
        3.1.11 数据分析
    3.2 结果
        3.2.1 Exemestane结合物的鉴定
        3.2.2 17β-DHE半胱氨酸结合物的鉴定
        3.2.3 EXE-cysteine和17β-DHE-cysteine的化学合成
        3.2.4 EXE-cysteine和17β-DHE-cysteine及相应内标的生物合成
        3.2.5 尿液和血浆中EXE及其代谢产物的定量
        3.2.6 UGT2B17,GSTM1和GSTT1的基因型
        3.2.7 UGT2B17,GSTM1和GSTT1的基因型与体内EXE代谢产物表现型的关系
    3.3 讨论
        3.3.1 半胱氨酸结合物是Exemestane的体内主要代谢产物
        3.3.2 半胱氨酸结合物可能的生物来源
        3.3.3 GSTs的潜在影响
        3.3.4 y-GT介导的GSH结合物的降解的可能路径
        3.3.5 潜在的半胱氨酸结合物
    3.4 本章小结
4 吸烟者中葡萄苷酸化基因型和NNAL代谢表现型间的关联性研究
    4.1 材料及方法
        4.1.1 化学药品及材料
        4.1.2 研究对象及样品
        4.1.3 基因型检测
        4.1.4 (S)-,(R)-和D4-NNAL葡萄苷酸的合成与纯化
        4.1.5 UPLC/MS分析
        4.1.6 定量
        4.1.7 数据分析
    4.2 结果
        4.2.1 UPLC/MS分析
        4.2.2 (S)-, (R)-和D4-NNAL葡萄苷酸的合成与纯化
        4.2.3 NNAL和NNAL-葡萄苷酸在尿液样品中的含量
        4.2.4 UGT2B10基因型与NNAL代谢的表现型的联系
        4.2.5 UGT2B17和UGT2B7基因型与NNAL代谢的表现型的联系
    4.3 讨论
        4.3.1 UPLC/MS方法的优越性
        4.3.2 UGT2B10,UGT2B17基因型与NNAL代谢的表现型的联系
        4.3.3 限制性
    4.4 本章小结
结论
参考文献
攻读学位期间发表的学术论文
致谢
附件


【参考文献】：
期刊论文
[1]中国肺癌和烟草流行及控烟现状[J]. 邹小农,贾漫漫,王鑫,支修益.  中国肺癌杂志. 2017(08)
[2]Revisions to the Tumor, Node, Metastasis staging of lung cancer(8th edition): Rationale, radiologic findings and clinical implications[J]. Fernando U Kay,Asha Kandathil,Kiran Batra,Sachin S Saboo,Suhny Abbara,Prabhakar Rajiah.  World Journal of Radiology. 2017(06)



本文编号：3708288