GDNF基因修饰的NSCs移植对暂时性缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用研究

发布时间：2022-12-05 01:13

　　目的探讨移植胶质细胞源性神经营养因子（glial cell line derived neurotrophic factor,GDNF）基因修饰的神经干细胞（neural stem cells,NSCs）对暂时性缺血性脑卒中大鼠的神经保护。方法用GDNF重组腺病毒载体转染新生大鼠NSCs（GDNF/NSCs）,分化培养7 d后,行免疫细胞化学染色检测微管相关蛋白2（MAP2）。采用改良的插线法制作暂时性脑缺血再灌注模型,3 d后经脑室分别移植生理盐水、NSCs和GDNF/NSCs。于再灌注后1、2、3、5、7周末处死大鼠,行免疫组织化学染色观察移植细胞在脑内的神经元分化及星形胶质细胞在缺血区形成胶质界膜情况,行Luxol fast blue（LFB）染色显示神经纤维损伤情况。结果 GDNF/NSCs体外分化为MAP2⁺细胞的比例显著高于NSCs的分化。移植细胞在脑内分化为MAP2⁺细胞,于再灌注第5周分化达高峰,GDNF/NSCs组于再灌注第3～7周,其MAP2⁺细胞显著高于NSCs组。各组缺血区由星形胶质细胞形成的血管... 

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【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 动物来源及主要试剂
    1.2 实验方法
        1.2.1 NSCs的体外培养、转染及分化
        1.2.2 制备暂时性大脑中动脉缺血模型及细胞移植模型制备和细胞移植见前期文献[2]
        1.2.3 免疫组织化学双标染色观察移植细胞在脑内的神经元分化
        1.2.4 免疫组织化学染色
        1.2.5 Luxol fast blue(LFB）染色
    1.3 统计学分析
2 结果
    2.1 NSCs和GDNF/NSCs体外分化为神经元
    2.2 移植的NSCs和GDNF/NSCs在脑内分化为神经元
    2.3 NSCs和GDNF/NSCs移植后改善神经纤维损伤
    2.4 NSCs和GDNF/NSCs移植对胶质界膜的修复
3 讨论



本文编号：3709369