rfaE基因通过MAPKs/NF-κB信号通路对副猪嗜血杆菌LOS诱导猪肺泡巨噬细胞炎症反应中作用的研究

发布时间：2022-12-17 19:06

　　作者拟研究rfaE基因在副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis,HPS）脂寡糖（LOS）刺激猪肺泡巨噬细胞（PAMs）信号通路分子的转录表达和MAPKs/NF-κB信号通路中的作用。提取HPS SC096株及其rfaE基因缺失株（ΔrfaE）和互补株（cΔrfaE）的LOS,分别用5和10μg HPS-LOS、ΔrfaE-LOS和cΔrfaE-LOS刺激PAMs,分别在不同时间点收集细胞,提取RNA和蛋白质。将提取的RNA反转录成cDNA,运用RT-PCR检测TLR4、MD2、NF-κB、MAP2 K2、ERK、P38和JNK的mRNA转录水平。测定提取蛋白质的浓度,利用Western blot方法检测NF-κB p65/phospho-NF-κB p65、IκBα、ERK1/2、JNK和p38/phospho-p38蛋白的表达量。结果表明用5和10μg HPS-LOS刺激细胞6、12和24h后,TLR4、MD2、MAP2K2、ERK、P38和JNK的mRNA转录水平均显著高于ΔrfaE-LOS刺激细胞后的以上转录因子的mRNA水平（P＜0.05）,但NF-κB的mRN... 

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 菌种、细胞
    1.2 主要试剂
    1.3 LOS的提取及浓度的测定
    1.4 猪肺泡巨噬细胞的培养及诱导
    1.5 总RNA的提取与反转录
    1.6 Real-Time PCR
    1.7 Western blot
    1.8 数据分析
2 结果
    2.1 RT-PCR检测LOS对PAMs信号通路分子的mRNA转录水平的影响
    2.2 Western blot检测LOS对NF-κB和MAPK信号通路的影响
3 讨论
4 结论


【参考文献】：
期刊论文
[1]rfaE基因在副猪嗜血杆菌LOS刺激猪肺泡巨噬细胞炎性因子mRNA转录中的作用[J]. 曾泽,岳华,冯晓辉,何欢,张斌.  畜牧兽医学报. 2015(07)



本文编号：3720479