膜荚黄芪香豆酸辅酶A连接酶基因(4CL)的克隆与表达分析
发布时间:2023-02-10 20:06
香豆酸辅酶A连接酶(4-coumarate:CoA lig-ase,4CL)是植物类黄酮类化合物和木质素等生物合成途径的一种关键酶,参与合成多种次生代谢物,在植物生长发育中起着重要作用。该试验采用同源克隆法和RACE技术从膜荚黄芪RNA中克隆得到4CL基因。利用生物信息学软件和荧光定量PCR技术,对该基因的功能和特征进行分析。结果表明:4CL基因(GenBank登录号KY086284)的cDNA序列长度为1 937 bp,其ORF编码546个氨基酸,属于疏水性蛋白。实时荧光定量PCR分析发现,Am4CL基因在根、茎、叶中的表达趋势与毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量基本一致,推测Am4CL基因在膜荚黄芪异黄酮生物合成中发挥着重要的作用。
【文章页数】:8 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 材料
1) 植物材料
2) 试剂及仪器
1.2 方法
1.2.1 引物设计
1.2.2 总RNA提取与cDNA的合成
1.2.3 4CL基因保守区克隆
1.2.4 5’RACE 和 3’RACE 扩增
1.2.5 4CL基因编码区的克隆
1.2.6 4CL基因的生物信息学分析
1.2.7 膜荚黄芪4CL基因的荧光定量PCR分析
1.2.8 毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的测定
1.2.9 统计分析
2 结果与分析
2.1 Am4CL基因全长cDNA克隆
2.2 膜荚黄芪4CL基因的序列分析
2.3 4CL的生物信息学分析
2.4 膜荚黄芪Am4CL基因表达量分析
3 讨论与结论
本文编号:3739832
【文章页数】:8 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 材料
1) 植物材料
2) 试剂及仪器
1.2 方法
1.2.1 引物设计
1.2.2 总RNA提取与cDNA的合成
1.2.3 4CL基因保守区克隆
1.2.4 5’RACE 和 3’RACE 扩增
1.2.5 4CL基因编码区的克隆
1.2.6 4CL基因的生物信息学分析
1.2.7 膜荚黄芪4CL基因的荧光定量PCR分析
1.2.8 毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的测定
1.2.9 统计分析
2 结果与分析
2.1 Am4CL基因全长cDNA克隆
2.2 膜荚黄芪4CL基因的序列分析
2.3 4CL的生物信息学分析
2.4 膜荚黄芪Am4CL基因表达量分析
3 讨论与结论
本文编号:3739832
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