GST-SRY融合蛋白原核表达和纯化及组蛋白修饰在SOX9基因表达中的作用

发布时间：2023-02-26 00:39

　　SRY是睾丸发育过程起着关键调节作用的基因之一,定位于Y染色体上。SRY是SOX家族的首个成员,与其它所有成员一样,有着一个共同特点,都含有一个极其保守DNA结合域-HMG。迄今为止,已发现SRY、SOX3、SOX8、SOX9、MIS、WT-1、SF-1、DAX-1等基因,它们参与了性别决定的重要过程。在本课题第二部分采用基因重组技术构建重组原核表达质粒,在大肠杆菌中表达GST-SRY融合蛋白并对其进行了纯化。实验中利用PCR技术将SRY基因进行扩增后,将其插入pGEX-6P-1的原核表达载体中,经双酶切与测序验证后,pGEX-6P-1/SRY转化到原核表达菌株E.coli Rosetta DE3,IPTG诱导表达GST-SRY融合蛋白,用GST标签纯化树脂对其进行纯化。本实验成功构建了融合表达载体pGEX-6P-1/SRY,并诱导和纯化GST-SRY融合蛋白,为后续进一步研究该蛋白的分子功能奠定基础。在我们前期实验研究中证实了SRY能调节WDR5基因表达,两者并协同上调转录因子SOX9的表达,随后我们构建WDR5过表达的LNCaP细胞株,在WDR5上调SOX9表达的过程中,发现SOX...

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【学位级别】：硕士

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缩略语表
摘要
ABSTRACT
第一章：绪论
第二章：GST-SRY融合蛋白原核表达和纯化
    材料
    方法
    结果
    讨论
    小结
第三章：组蛋白修饰对SOX9基因的表达的作用
    材料
    方法
    结果
    讨论
    小结
参考文献
致谢
综述
    参考文献



本文编号：3749477