过表达GATA-4基因的骨髓间充质干细胞外泌体对心肌梗死后心功能的影响

发布时间：2023-03-11 09:09

　　目的过表达GATA-4基因的骨髓间充质干细胞(BMSC)外泌体(BMSC^GATA-4-外泌体)可以促进BMSC向心肌样细胞分化,但其分子机制不详。文章探讨过表达BMSC^GATA-4-外泌体通过miRNA-673-5p/Tsc-1分子轴促进干细胞向心肌样细胞分化的机制。方法将BMSC-外泌体、BMSC^空载体-外泌体、BMSC^GATA-4-外泌体、 BMSC^{miR-673-5p-mimic}-外泌体、BMSC^{miR-673-5p-inhibitor}-外泌体小鼠建模后48 h经尾静脉注入,分别作为BMSC组、空载体组、GATA-4组、模拟组、抑制组,每组3只;另设置梗死未处理组(建模,未给予任何exosome处理)及正常组(不建模)作为对照,各3只。采用心脏彩超检测各组心功能。采用RT-PCR检测梗死后心肌细胞内miRNA-673-5p表达。同时提取相同梗死部位心肌组织,采用RT-PCR检测心肌α-actin、CX43、Desmin、cTnT表达。采用Wester...

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【文章目录】：
0 引 言
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 小鼠BMSC的分离、培养及鉴定
        1.2.2 构建过表达GATA-4基因BMSC
        1.2.3 实验动物
        1.2.4 小鼠心肌梗死模型的建立
        1.2.5 细胞的分组及处理
        1.2.6 检测各组心肌细胞内miRNA-673-5p及心肌细胞α-actin、CX43、Desmin、cTnT表达
        1.2.7 采用数据库明确miRNA-673-5p的靶基因
        1.2.8 Western blot检测
    1.3 统计学分析
2 结 果
    2.1 小鼠BMSC三系分化结果
    2.2 慢病毒转染小鼠BMSC后24 h GATA-4的表达
    2.3 采用心脏彩超评估心功能改变
    2.4 RT-PCR检测各组心肌细胞内miRNA-673-5p表达
    2.5 RT-PCR检测各组心肌梗死后心肌细胞内心肌细胞特异性分子表达
    2.6 Western blot检测各组相同心肌梗死部位心肌细胞内miRNA-673-5p对应靶基因蛋白的表达
3 讨 论



本文编号：3759597