中国汉族额颞叶痴呆患者致病基因筛查和功能研究

发布时间：2023-03-16 18:36

　　背景:额颞叶痴呆(Frontotemporal disease,FTD)是一种常染色体显性遗传的神经系统退行性疾病,临床上以隐匿起病、逐渐进展的精神行为异常,执行功能损害和(或)语言障碍为特征。FTD也是仅次于阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)的第二常见的早发性痴呆。根据典型的临床表现可分为行为变异型额颞叶痴呆(bv FTD),语义性痴呆(SD)和进行性非流利性失语(PNFA)三种临床类型。多达15%的FTD患者合并运动神经元病。约40%的FTD患者具有确切的阳性痴呆家族史,但仅有10%的患者具有明确的常染色体显性遗传模式。目前已经证实FTD至少有8种致病基因,分别是MAPT、C9ORF72、GRN、TBK1、CHMP2B、FUS、VCP、TARDBP等。其中MAPT是最早发现的FTD的致病基因。迄今为止,总共在160个家系发现了57个MAPT致病变异。而我国FTD患者的致病基因变异报道较少,因此有必要进一步明确我国汉族FTD患者的致病基因变异谱,尤其是MAPT基因变异谱。目的:筛查并确认我国FTD患者的致病基因变异,探讨致病变异特点及其与临床表型的关系。方法:2...

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【学位级别】：硕士

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缩略词表
引言
1 研究内容和方法
    1.1 研究对象
        1.1.1 研究对象及样本收集
        1.1.2 病例纳入标准
    1.2 主要实验材料与试剂
        1.2.1 细胞系、菌种和质粒
        1.2.2 主要试剂
        1.2.3 主要仪器
    1.3 实验方法
        1.3.1 血液标本采集
        1.3.2 基因组DNA抽提及浓度测定
        1.3.3 APOE基因检测
        1.3.4 全外显子测序流程
        1.3.5 全外显子测序变异位点分析
        1.3.6 全外显子测序变异位点Sanger测序和家系成员一代验证
        1.3.7 定点诱变构建突变型MAPT表达质粒
        1.3.8 去内毒素质粒中量抽提
        1.3.9 HEK293T和 PC12 细胞系培养
        1.3.10 细胞质粒转染
        1.3.11 蛋白印记实验(Western blot)
        1.3.12 细胞免疫荧光检测
        1.3.13 重组蛋白表达与纯化实验流程
        1.3.14 白细胞RNA提取与逆转录
        1.3.15 统计学分析
2 结果
    2.1 入组病人临床特点
    2.2 全外显子测序变异位点结果分析
    2.3 携带MAPT和 GRN变异病人的临床特征
    2.4 东亚人群报道的MAPT基因致病性质不明的变异
    2.5 MAPT基因新变异对Tau蛋白磷酸化水平的影响
    2.6 Tau蛋白磷酸化表现为特定位点的改变
    2.7 p.R406Q和 p.D430H变异不影响tau与微管结合
    2.8 MAPT变异对微管组装的影响
    2.9 MAPT变异对肝素钠诱导tau蛋白自身聚集的影响
    2.10 GRN基因外显子跳跃及m RNA水平
3 讨论
4 结论
参考文献
综述 MAPT基因变异和相关神经变性病的研究进展
    参考文献
作者简历



本文编号：3763099