葡萄褪黑素含量变化及其合成基因SNAT原核表达分析

发布时间：2023-03-29 04:55

　　褪黑素是一种吲哚胺类激素,广泛存在于大多数有机体中。作为一种抗氧化剂和自由基清除剂,褪黑素可参与调节动、植物体内多种生理功能。人体可通过外源摄入褪黑素含量丰富的水果以增加血液中内源褪黑素含量和抗氧化能力。葡萄作为一种经济栽培果树,营养价值丰富,目前有关葡萄中内源褪黑素含量变化的研究不多。本研究调查了不同胁迫条件和不同发育时期对葡萄内源褪黑素含量的影响,并且对葡萄中褪黑素合成基因进行初步的筛选,结合qRT-PCR技术分析果实不同发育阶段褪黑素合成基因的表达模式,进一步探究褪黑素及其前体物质的含量与褪黑素合成基因之间的相关性;此外还克隆了葡萄5-羟色胺-N-乙酰转移酶(SNAT)基因的CDS序列,采用原核表达系统在大肠杆菌中诱导该基因产生可溶性蛋白,初步研究了葡萄SNAT基因的特性和酶学功能。主要研究结果如下:1.干旱胁迫和盐胁迫下葡萄幼苗根系和叶片中褪黑素含量较对照组均显著增加,且胁迫程度越强增幅越大。用120 mmol/l的Nacl溶液处理葡萄幼苗,6 d后幼苗根系和叶片中褪黑素含量分别达到627.25和3220.42 pg/g,均为相应对照组幼苗根系和叶片中褪黑素含量的7倍。10%聚...

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【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
第一章 引言
    1.1 褪黑素概述
    1.2 植物中褪黑素的研究进展
        1.2.1 植物中褪黑素的合成路径
        1.2.2 植物中褪黑素的含量
        1.2.3 植物中褪黑素的生理功能
    1.3 植物中褪黑素合成基因SNAT的研究进展
    1.4 研究目的及意义
第二章 干旱和盐胁迫下葡萄幼苗不同组织褪黑素含量分析
    2.1 材料和方法
        2.1.1 主要试剂及仪器
        2.1.2 植物材料
        2.1.3 试验方法
    2.2 结果与分析
        2.2.1 褪黑素含量测定方法分析
        2.2.2 胁迫条件下葡萄幼苗根部和叶片中褪黑素含量的变化
    2.3 讨论
第三章 果实发育期褪黑素含量变化及其相关基因表达分析
    3.1 材料与方法
        3.1.1 植物材料
        3.1.2 褪黑素及其合成前体物质的提取与检测
        3.1.3 RNA提取与qRT-PCR检测相关基因表达量
    3.2 结果
        3.2.1 ‘美乐’葡萄果实发育期褪黑素及其前体物质含量的变化
        3.2.2 ‘美乐’葡萄果实发育期褪黑素合成酶基因表达量的变化
    3.3 讨论
第四章 葡萄SNAT基因的原核表达分析
    4.1 材料与方法
        4.1.1 试验材料
        4.1.2 菌株与质粒
        4.1.3 试验方法
    4.2 结果与分析
        4.2.1 葡萄SNAT基因序列的分析
        4.2.2 葡萄SNAT氨基酸序列同源性比较及聚类分析
        4.2.3 葡萄SNAT基因的原核表达
        4.2.4 重组蛋白酶学特性分析
    4.3 讨论
第五章 全文结论
    5.1 主要结论
        5.1.1 不同胁迫条件下葡萄幼苗褪黑素含量变化
        5.1.2 不同发育期葡萄果实褪黑素及其前体物质含量变化
        5.1.3 不同发育期葡萄褪黑素合成基因表达模式
        5.1.4 葡萄SNAT基因的原核表达及酶活分析
    5.2 创新点
    5.3 下一步工作展望
参考文献
致谢
作者简历



本文编号：3774044