麻点璃眼蜱和钝刺血蜱铁蛋白基因的克

发布时间：2023-04-29 18:11

　　蜱是一种吸血的体外寄生虫,具有非常广泛的宿主范围。本研究中的麻点璃眼蜱(Hyalomma rufipes)为二宿主蜱,常见于荒漠和半荒漠地区,一般分布在我国的内蒙古、山西、宁夏、新疆等地。钝刺血蜱(Haemaphysalis doenitzi)为三宿主蜱,常见于野地和丛林中,主要分布在我国海南、福建、台湾、云南等地。蜱在吸血过程中能够传播多种病原体,对人类健康和畜牧业的发展产生极大威胁。目前蜱传疾病的防治仍以化学防治为主,但是长期使用化学药物会对环境造成污染,并且蜱长期适应产生的耐药性也是化学防治的短板,因此生物防治、免疫防治以及基因组学等逐渐成为蜱类防治的研究热点。铁蛋白(Ferritin)普遍存在于动物、植物和微生物中,是生物体维持铁稳态的重要蛋白,在解毒、抵抗氧化应激、参与先天免疫应答等方面发挥着不可或缺的作用。蜱吸血时要应对宿主血液中的大量铁和外源微生物,研究铁蛋白在蜱血餐消化和免疫防御过程中的作用机制具有深远意义。本论文以麻点璃眼蜱和钝刺血蜱为研究对象,利用基因克隆、原核表达、荧光定量PCR、RNAi等技术,系统的研究了三种蜱类铁蛋白。通过基因克隆,得到三条铁蛋白基因,分别命...

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
1 综述
    1.1 蜱的概述
        1.1.1 蜱的介绍
        1.1.2 蜱的防治
    1.2 铁蛋白的研究进展
        1.2.1 铁蛋白的分类
        1.2.2 铁蛋白的结构
        1.2.3 铁蛋白的功能
    1.3 研究目的和意义
2 麻点璃眼蜱和钝刺血蜱铁蛋白基因的克隆
    2.1 材料和方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 实验结果
        2.2.1 HrFer1、HrFer2和HdFer基因的克隆
        2.2.2 HrFer1、HrFer2和HdFer的生物信息学分析
    2.3 讨论
3 麻点璃眼蜱和钝刺血蜱铁蛋白基因的原核表达
    3.1 材料和方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 实验结果
        3.2.1 创建表达载体
        3.2.2 初步诱导表达
        3.2.3 重组蛋白的质谱鉴定
        3.2.4 表达条件的优化
        3.2.5 rHrFer1、rHrFer2和rHdFer的纯化
    3.3 讨论
4 麻点璃眼蜱和钝刺血蜱铁蛋白基因的功能分析
    4.1 材料和方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 方法
    4.2 实验结果
        4.2.1 铁螯合活性分析
        4.2.2 抗氧化活性分析
        4.2.3 HrFer1、HrFer2和HdFer的表达量分析
        4.2.4 RNA干扰分析
        4.2.5 低温胁迫对HrFer1和HrFer2 表达量的影响
    4.3 讨论
5 小结
参考文献
致谢
攻读学位期间取得的科研成果清单



本文编号：3805485