神经营养因子-3基因修饰的骨髓间充质干细胞和水凝胶联合应用对脊髓损伤模型大鼠的治疗作用研究

发布时间：2023-08-08 20:16

　　目的研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)、神经营养因子-3(neurotrophic factor-3,NT-3)、水凝胶(hydrogels)对脊髓损伤的联合治疗作用。方法首先,培养大鼠BMSC基因修饰,使其过表达NT-3,制作水凝胶并搭载细胞。然后,建立大鼠急性不完全性脊髓损伤模型并植入相应治疗。最后,术后通过运动行为学(Basso Beatlie Bresnahan,BBB评分)和病理学检测其对脊髓损伤的治疗作用。结果各个联合治疗组大鼠BBB评分均有不同程度增加,BMSC+NT-3+hydrogels组治疗作用最为明显。免疫组织化学检测显示各个联合治疗组神经元、神经纤维数目均有不同程度增加,星形胶质细胞数目较少。治疗组中,BMSC+NT-3+hydrogels组大鼠神经元、神经纤维数目最多,星形胶质细胞数目最少。所有结果组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论细胞(BMSC)、因子(NT-3)和支架(hydrogels)在治疗脊髓损伤中相互促进,联合移植于急性不完全性脊髓损伤模型大鼠,可提升模型大鼠后...

【文章页数】：12 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 实验动物
    1.2 主要试剂与仪器
    1.3 实验方法
        1.3.1 骨髓间充质干细胞的分离培养、基因修饰、鉴定与诱导分化
        1.3.2 免疫印迹试验(Western blot)检测基因编辑细胞后相关蛋白的表达
        1.3.3 水凝胶的制备
        1.3.4 动物分组及急性不完全性脊髓损伤大鼠模型构建
        1.3.5 运动行为学检测(BBB)
        1.3.6 组织取材及切片
        1.3.7 染色方法
    1.4 统计学方法
2 结果
    2.1 骨髓间充质干细胞培养与转染的形态观察
    2.2 基因修饰的骨髓间充质干细胞的蛋白表达验证
    2.3 骨髓间充质干细胞的流式细胞学验证
    2.4 骨髓间充质干细胞细胞生长曲线活力检测
    2.5 骨髓间充质干细胞成脂、成骨诱导分化后细胞生长情况和形态
    2.6 水凝胶支架的形态观察
    2.7 急性不完全性脊髓损伤大鼠模型的建立与治疗
    2.8 SD大鼠运动行为学BBB评分
    2.9 手术造模治疗8周后大鼠组织病理学检测
3 讨论



本文编号：3840410