生物膜群感效应调控对细菌耐药性转移和毒力因子表达影响机制研究

发布时间：2023-09-17 16:01

　　近年来,细菌耐药性传播和细菌致病性成为当前社会面临的公共卫生难题之一。铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)是一种环境中普遍存在的条件致病菌,通常以生物膜形式存在,能够分泌多种毒力因子,还可以通过多种方式获得抗生素耐药性,进而给临床治疗和生态环境带来更加严重的威胁。质粒介导的接合转移是细菌耐药性传播重要方式之一。生物膜的形成一方面可保护细菌免受抗菌药物的作用,增强细菌群体的耐药性。另一方面,由于生物膜内细菌丰度较高,给耐药基因的接合转移创造了良好的条件。铜绿假单胞菌的致病性主要归因于毒力因子的分泌,而毒力因子的分泌也与生物膜的形成密切相关。因此,生物膜的调控是控制细菌耐药性和致病性的关键之一。有研究表明,群感效应在控制细菌生物膜形成和毒力因子产生中具有举足轻重的作用。因此,借助群感淬灭效应调控细菌生物膜和毒力因子分泌,有可能成为控制细菌耐药性污染和致病性的有效方式。有研究表明,植物提取物香草醛对可作为一种天然的群感效应抑制剂来调控细菌群感效应系统。本文考察了铜绿假单胞菌群感效应调控对其生物膜的形成及生物膜内细菌耐药基因接合转移的影响机制,探索了香草醛对耐药细...

【文章页数】：78 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
    1.1 细菌耐药性污染与细菌感染
        1.1.1 细菌耐药性研究现状
        1.1.2 耐药基因的传播扩散
        1.1.3 致病菌的耐药性和致病性
    1.2 耐药细菌的生物膜
        1.2.1 铜绿假单胞菌生物膜的形成
        1.2.2 生物膜与细菌耐药性
        1.2.3 生物膜内耐药基因转移
    1.3 细菌的群体调控
        1.3.1 细菌群感效应概述
        1.3.2 群感效应抑制剂
        1.3.3 铜绿假单胞菌的群感效应系统
        1.3.4 群感效应对生物膜和耐药基因转移的调控
        1.3.5 群感效应对毒力因子的调控研究
    1.4 研究目的、意义和内容
        1.4.1 本研究的目的和意义
        1.4.2 研究的主要内容
第二章 群感效应调控对生物膜形成和耐药性转移的影响研究
    2.1 引言
    2.2 材料与方法
        2.2.1 实验仪器与试剂
        2.2.2 实验质粒、菌株与培养
        2.2.3 含RP4质粒大肠杆菌的构建
        2.2.4 亚抑菌浓度的测定
        2.2.5 生长曲线的绘制
        2.2.6 接合转移实验
        2.2.7 RNA提取、cDNA合成及RT-qPCR定量
        2.2.8 信号分子的提取
        2.2.9 生物膜的培养及其含量的测定
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 RP4质粒转化大肠杆菌结果
        2.3.2 香草醛亚抑菌浓度的确定
        2.3.3 香草醛对耐药菌株生长的影响
        2.3.4 QS相关基因表达水平的测定
        2.3.5 AHL信号分子的检测
        2.3.6 香草醛对耐药菌株生物膜形成的影响
        2.3.7 香草醛对RP4质粒接合转移的影响
    2.4 本章小结
第三章 香草醛对铜绿假单胞菌毒力因子的影响
    3.1 引言
    3.2 材料与方法
        3.2.1 实验试剂与仪器
        3.2.2 绿脓菌素含量测定
        3.2.3 细菌的蹭行运动检测
        3.2.4 RNA提取、cDNA合成及qPCR定量
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 香草醛对PAO1绿脓菌素含量的影响
        3.3.2 细菌的蹭行运动性
        3.3.3 PAO1毒力基因motA表达水平的测定
    3.4 本章小结
第四章 结论与展望
    4.1 结论
    4.2 展望
参考文献
致谢
学位论文评阅及答辩情况表



本文编号：3847749