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褐黄血蜱卵黄蛋白原家族的基因克

发布时间:2023-10-29 13:18
  以褐黄血蜱唾液腺蛋白质组分析结果为线索,唾液腺转录组序列为依据,设计引物,扩增褐黄血蜱卵黄蛋白原家族基因全长,观察四种基因在褐黄血蜱的表达水平及在卵中的分布情况,以便为探索通过消减营养物质,干扰胚胎发育,实现控蜱目标的新策略奠定基础。RACE法扩增Vg-1、Vg-2、Vg-3和Vg-B的3’和5’端序列,获得编码Vg-1、Vg-2、Vg-3和Vg-B四基因的全长cDNA序列。Vg-1基因全长5453bp,ORF长5079bp,编码1693个氨基酸;Vg-2基因全长4953bp,ORF长4671bp,编码1557个氨基酸;Vg-3基因全长4811bp,ORF长4602bp,编码1534个氨基酸;Vg-B基因全长9754bp,ORF长9576bp,编码3192个氨基酸。qPCR分析结果表明:Vg-1、Vg-2、Vg-3和Vg-B四基因在幼、若、雌成蜱不同发育阶段表达水平为幼蜱<若蜱<雌成蜱;在不同的饱血状态下的表达水平均为1/4饱血雌成蜱<1/2饱血雌成蜱<3/4饱血雌成蜱<饱血雌成蜱;在唾液腺中的表达水平均随血餐增加而上调;在卵巢中的表达水平均随着血餐增加而...

【文章页数】:74 页

【学位级别】:硕士

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摘要
Abstract
第一章 研究背景
    1.1 蜱及其防控
    1.2 褐黄血蜱及其研究进展
    1.3 褐黄血蜱卵的构成及卵黄发生
    1.4 蜱类卵黄蛋白原研究概况
    1.5 本研究的目的及意义
第二章 褐黄血蜱卵黄蛋白原家族的全长克隆
    2.1 材料与方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 结果与分析
        2.2.1 褐黄血蜱Vg-1基因全长的克隆
        2.2.2 褐黄血蜱Vg-2基因全长的克隆
        2.2.3 褐黄血蜱Vg-3基因全长的克隆
        2.2.4 褐黄血蜱Vg-B基因全长的克隆
        2.2.5 褐黄血蜱Vg家族四个基因c DNA全长及生物信息学分析
    2.3 讨论
第三章 褐黄血蜱卵黄蛋白原家族基因的表达水平分析
    3.1 材料与方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 结果与分析
        3.2.1 褐黄血蜱四种Vg基因荧光定量测定方法的建立
        3.2.2 褐黄血蜱四种Vg基因的表达水平分析
    3.3 讨论
第四章 褐黄血蜱卵蛋白质组分析
    4.1 材料与方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 方法
    4.2 结果与分析
        4.2.1 褐黄血蜱卵总蛋白SDS-PAGE卵总蛋白检测
        4.2.2 液相色谱-质谱肽段检测
    4.3 讨论
第五章 结论
参考文献
附录
主要缩略语表
致谢
作者简介



本文编号:3858155

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