DJ-1基因慢病毒的构建及耳蜗螺旋神经节细胞转染研究

发布时间：2023-12-09 11:58

　　[目 的]蒙古沙鼠圆窗膜上滴注不同浓度的哇巴因,建立不同程度耳蜗螺旋神经节细胞(Spiral Ganglion Cells,SGCs)损伤的动物模型;通过该动物模型鼓阶内注入DJ-1基因慢病毒,研究耳蜗SGCs受损后,DJ-1基因慢病毒的转染及其保护作用。[方 法]①听力正常的雄性蒙古沙鼠随机分成实验组与对照组。对照组沙鼠的右耳圆窗膜上滴注人工外淋巴液0.2ml,实验组沙鼠分成A、B、C三组并在右耳圆窗膜分别滴注浓度为33 μM、66 μ M、80 μM总量为0.2ml的哇巴因建立动物模型。②包装DJ-1基因慢病毒。③听力正常的蒙古沙鼠随机分为实验组及对照组,对照组沙鼠右耳圆窗膜上滴注人工外淋巴液0.2ml,并于鼓阶注入DJ-1基因慢病毒;实验组沙鼠分成A、B、C三组并于右耳圆窗膜分别滴注浓度为33μM、66μM、80μM总量为0.2ml的哇巴因,每组鼓阶注入DJ-1慢病毒。两周后行Western Blot实验检测DJ-1蛋白质的表达。③在蛋白质确切表达的基础上观察DJ-1对于不同程度耳蜗螺旋神经节细胞损伤的修复作用。[结 果]形态学观察发现:随着哇巴因浓度的上升,SGCs数量逐渐下降...

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【学位级别】：硕士

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缩略词
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前言
材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 实验动物
        1.1.2 主要试剂及仪器设备
        1.1.3 试剂配方
    1.2 方法
        1.2.1 实验分组及处理因素
        1.2.2 建立动物模型
        1.2.3 慢病毒的包装
        1.2.4 标本制作方法
        1.2.5 电泳、转膜、孵育抗体及显影
        1.2.6 耳蜗石蜡切片制作步骤
        1.2.7 统计学处理
结果
    2.1 慢病毒包装及WESTBLOT结果分析
    2.2 光镜结果分析
        2.2.1 光镜下耳蜗病理切片形态学观察
        2.2.2 耳蜗螺旋神经节细胞密度的比较
讨论
    3.1 SGCs损伤所致感音神经性耳聋
    3.2 慢病毒发现、发展及前景
    3.3 慢病毒包装DJ-1与螺旋神经细胞
    3.4 可能存在的问题
结论
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间获得的学术成果
致谢



本文编号：3871529