全基因组外显子测序发现的三种PSIS可能致病基因的体外功能验证

发布时间：2024-01-28 21:28

　　目的:探究三种由全基因组外显子测序筛选所得的PSIS可能致病基因体外的功能验证,为垂体柄中断综合征病因研究的体内实验提供理论依据。方法:利用全基因组外显子测序技术对1例合并中枢性性早熟的垂体柄中断综合征患儿及父母(一共三例,父母为对照)进行基因,经过对比和深入分析,初步确定可能的致病基因。针对上述的基因,首先进行确认,进一步设计小干扰RNA(siRNA)分别转染至GH3细胞内,每种基因均设置实验纸阴性对照组(Negative Control Group,NC)、空白对照组(Blank Group)。通过RT-PCR筛选出各基因最佳的siRNA敲低序列以用于复筛,Western Blot(WB)复筛各基因最佳敲低序列在蛋白水平的表达,以确定目标基因进行下一步研究。依次运用CCK-8(cell counting kit-8)检测细胞增殖能力及形态,细胞划痕实验检测细胞迁移,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞分泌功能,WB检测垂体特异性转录因子-1(pit-oct-uncclass 1 homeobox 1,POU1F1...

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中英文缩略表
中文摘要
英文摘要
前言
    参考文献
第一部分: 1例合并中枢性性早熟垂体柄中断综合征患儿临床资料及全基因组外显子测序分析
    引言
    研究对象和方法
    结果
    讨论
    结论
    参考文献
第二部分: 全基因组外显子测序发现的三种可能致病基因的体外功能研究
    引言
    研究对象和方法
    结果
    讨论
    结论
    参考文献
综述
    参考文献
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本文编号：3887805