油菜HXK9基因功能初探

发布时间：2024-02-02 12:46

　　糖代谢是植物体内的主要代谢过程,葡萄糖只有经过己糖激酶(HXK)催化成葡萄糖-6-磷酸后才能进入糖酵解途径,为植物体的生长发育和代谢活动提供物质和能量。通过高油/低油近等基因系转录组测序发现HXK9在脂肪酸代谢中有重要的作用,利用RNA干扰技术构建RNAi载体,利用花粉介导法将RNA干扰的HXK9基因转入甘蓝型油菜品系7B中,对HXK9基因的功能进行了初步研究。研究发现:1.整合的RNAi-HXK9基因在后代植株中可以稳定遗传,性状分离符合孟德尔分离定律;2.通过q RT-PCR测定发现RNAi植株中HXK9基因的表达量明显降低了,为野生型植株的23.59%-66.94%;3.在种子萌发期,与野生型植株相比RNAi植株幼苗的胚轴伸长、根长和侧根数都明显减小,出真叶的时间比野生型幼苗晚2-3天;4.在植株生长过程中RNAi植株的株型小于野生型植株,叶子形状也更加卷曲;5.RNAi植株的现蕾时间与野生型相比提前了26-41天;花器官出现了全部或是部分败育的情况,花粉的萌发率严重降低,种子的体积和千粒重减小了;6.RNAi植株叶子的表面有透明粘稠状液体的分泌,通过苯酚-硫酸实验证明为糖类,且...

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图2pCaMHXK9-RNAi质粒的PCR检验M:分子量标记；P0:空质粒；P:pCaMHXK9-RNAi质粒

油菜HXK9基因功能初探然后种植于温室，利用PCR扩增进行油菜植US基因的分离比如表3所示，从表3中我们10和BT2-11中显示出GUS基因预期的3：这就意味着RNAi植物株系BT2-1，BT2-10T2-9和BT2-12中的T2RN....

图3样品总DNA电泳图

0:emptyplasmid；P:pCaMHXK9-RNAiplasmid图3样品总DNA电泳图M:分子量标记；W:野生型植株；1-9:拟RNAi型植株Figure3SampletotalDNAelectrophoresismapM:molecularw....

图4PCR产物电泳图

图4PCR产物电泳图M：分子量标记；P：pCaMHXK9-RNAi质粒；W：野生型植株；1-5：RNAi植株Figure4PCRproductelectrophoresismapM：molecularweightmarker；P：pCaMHXK9-RNA....

图5幼苗的水培生长A:WT为野生型幼苗的水培生长，BT1-20为RNAi幼苗的水培生长；B:幼苗胚轴的伸长；C：幼苗根的伸长；D：幼苗侧根的数目

油菜HXK9基因功能初探24图5幼苗的水培生长A:WT为野生型幼苗的水培生长，BT1-20为RNAi幼苗的水培生长；B:幼苗胚轴的伸长；C：幼苗根的伸长；D：幼苗侧根的数目Figure5HydroponicgrowthofseedlingsA:WTis....

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