类聚异戊二烯产物基因工程菌的构建

发布时间：2024-02-02 21:34

　　类聚异戊二烯产物一类以焦磷酸异戊二烯酯聚合形成的聚合产物,类聚异戊二烯产物包括低聚产物和高聚产物,其都有很广泛的应用价值。低聚产物如角鲨烯作为保湿剂和润肤剂广泛用于化妆品中,并有多种促进健康的功能,包括抑制肿瘤,增强免疫力等作用。高聚产物如聚异戊二烯作为天然橡胶主要应用于制造轮胎、胶乳、胶鞋、胶带等。但目前两者在大量生产上都受到限制,因此开发类聚异戊二烯产物的合成生物方法具有重要的应用价值。本课题在合成生物学的基础上进行代谢工程的构建,主要是以大肠杆菌为宿主菌,构建甲羟戊酸途径(MVA pathway)的完整途径。通过微生物细胞来生产目标产物角鲨烯和聚异戊二烯。本课题主要工作:(1)甲羟戊酸菌株的优化。基于构建甲羟戊酸上游代谢途径pET28a-ES,将其酶切筛选后进行大肠杆菌为宿主菌的优化。首先对大肠杆菌宿主菌优化时选取了E.coli DH5α和E.coli BL21两种宿主菌进行比较优化,明确E.coli BL21对于甲羟戊酸代谢途径的适配性更好;然后发酵培养基选取了 LB培养基、M9培养基和X培养基三种培养基进行比较优化,经比较菌株在X培养基中发酵生长最佳。其中实验菌株BLES在X...

【文章页数】：95 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－２甲羟戊酸途径??Ｆｉｇ．?１－２?ＭＶＡ?ｐａｔｈｗａｙ??－

二甲基丙烯基焦磷酸（ＤＭＡＰＰ）。??２?１?Ａｃｅｔｙｌ－ＣＯＡ?？?？?Ｊ?ＤＭＡＰＰ??＾ＳＣｏＡ?〇－ｐ＿〇＿ｐ＿〇—??〇?０??１ＡＡＣＴ?Ａ??Ｔ?ＩＤ１??９?９?Ａｃｅｔｏａｃｅｔｙｌ－ＣｏＡ?〇?９?Ｉ?ＩＰＰ??八?ＳＣ０Ａ?Ｈ??＾?ＨＭＧＳ?ｔ?ＭＶＤ１....

图１－３角鲨烯合成的代谢途径??Ｆｉｇ．?１－３?Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ?ｐａｔｈｗａｙ?ｏｆ?ｓｑｕａｌｅｎｅ?ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ??

??角鲨烯生物合成中ＭＶＡ途径大致可以分为三个阶段：（１）生成乙酰辅酶Ａ；?（２）在??ＭＶＡ途径的代谢过程中将乙酰辅酶Ａ转变生成ＩＰＰ和ＤＭＡＰＰ或ＤＭＡＤＰ、法尼基??焦磷酸（ＦＰＰ或ＦＤＰ）；?（３）ＦＰＰ聚合形成角鲨烯分子［４２＼其中由乙酰－ＣｏＡ合成ＩＰＰ、??ＤＭＡＰ....

图１－４橡胶树中橡胶的生物合成??Ｆｉｇ．?１－４?Ｂｉｏｓｙｎｔ?ｈｅｓｉｓ?ｏｆ?ｒｕｂｂｅｒ?ｉｎ?ｒｕｂｂｅｒ?ｔｒｅｅｓ??ｃ／ｒ，

ｐｈａｔｅ??〇?—?！？，．〇＿￥＿〇’＊＂、？一’、？?一￣＇’八?＇?ｏｈ??Ｏ?Ｏ?Ｉ??１?ＥＲＧ１９??〇?〇?Ｊ?ＯＭＡＰＰ?ＩＤＵ?？?？产、Ｊ＾、！ｐｐ??〇—ｐ—〇—ｐ?—〇?、－’、、＇??ｌｉ?ｉ；?Ｈ?ＩＩ??〇?〇?？?Ｏ?〇?，??ｆｄｓ?Ｉ????....

图１－５本课题的类聚异戊二烯产物的代谢途径??Ｆｉｇ．?１－５?Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ?ｒｏｕｔｅ?ｏｆ?ｐｏｌｙｉｓｏｐｒｅｎｅ－ｌｉｋｅ?ｐｒｏｄｕｃｔｓ?ｏｆ?ｔｈｉｓ?ｓｕｂｊｅｃｔ??

?第一章绪论???￣?￣＇￣＇

本文编号：3893203