矮牵牛PhRAX2与PhRAX3基因的克隆及表达分析

发布时间：2024-02-14 18:53

　　矮牵牛(Petunia hybrida.),茄科碧冬茄属,花色丰富、花期长,在园林中的应用极为广泛。同时,矮牵牛转基因较为容易,生长周期短,目前已成为分枝发育及抗逆研究的模式植物。矮牵牛栽培过程中需要多次打顶来控制株型,大大提高了生产成本。因此,培育多分枝的新品种是解决矮牵牛高效生产的关键。此外,干旱等逆境胁迫是限制矮牵牛应用范围的主要因素。因此,培育抗逆性强的新品种是矮牵牛研究的重要方向。为初步探究矮牵牛PhRAX2和PhRAX3的功能,克隆了 PhRAX2、PhRAX3的全长序列以及PhRAX3的启动子序列,对其生物信息学进行了分析,并对PhRAX2及PhR4X3在不同组织,不同处理下的表达特性进行了研究。构建了PhRAX2、PhRAX3过表达载体,以及pPhRAX3融合GUS载体,并转入农杆菌。具体结果如下:1、克隆了R2R3-MYB家族基因PhR4X2,该基因全长864 bp,与烟草NtRAX2的相似性高达70%;克隆1R-MYB家族基因PhRAX3,该基因全长1539 bp,与番茄S1RAX3、辣椒CaRAX3等物种的前80个氨基酸序列相似度极高;克隆PhRAX3的启动子序列...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图３－１荧光定量ＰＣＲ引物检测??Ｆｉｇ．?３－１?Ｔｈｅ?ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ?ｐｒｉｍｅｒｓ??

２０００??１０００??２５０?■二二＇蒙，〈：：＇?务ｋ４：１?知Ｊ??１?００?Ｉ？‘々乂遞赛輩‘釋靖次＇ＶＶ?，４??图３－１荧光定量ＰＣＲ引物检测??Ｆｉｇ．?３－１?Ｔｈｅ?ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ?ｐｒｉｍｅｒｓ??注：Ｍ：?ＤＬ?２０００；?....

图４－１?Ｍ／ＭＶ２的扩增结果（８６４?ｂｐ）??Ｆｉ．?４－１?Ａｍｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ＰｈＲＡＸ２（８６４?ｂｐ）??

物信息学分析??根据己经公布的矮牵牛基因组序列设计引物ＲＡＸ２－Ｆ／ＲＡＸ２－Ｒ，通过ＰＣＲ扩增，??并对目的条带进行胶回收，测序后获得长度为８６４?ｂｐ的ｃＤＮＡ片段。通过ＮＣＢ１??数据库应用ｂｌａｓｔ对比，结果显示该片段与矮牵牛基因组公布序列一致且与烟草??的?（ＸＭ＿０１....

图４－２?基因的全长ｃＤＮＡ及氨基?

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图４－３?ＰｈＲＡＸ２的二级结构图??Ｆｉｇ．?４－３?Ｐｒｅｄｉｃｔｅｄ?ｓｅｃｏｎｄａｒｙ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ＰｌｉＲＡＸ２??

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本文编号：3898441