水稻类病斑基因SPL36的克隆与功能分析

发布时间：2024-02-17 23:42

　　植物类病斑是在没有生物或非生物胁迫情况下自发产生的坏死斑,对类病斑突变体的研究可以剖析细胞程序性死亡以及植物防御反应相关途径的调控机制。本研究通过EMS化学诱变处理水稻粳稻品种云稻,从诱变得来的突变体库中筛选到一个可稳定遗传类病斑表型的突变体spl36。利用生理生化和细胞学等实验手段探究基因SPL36如何出现细胞程序化死亡(PCD),利用图位克隆等方式将SPL36定位并通过测序比对发现SPL36突变位点,另外针对确定的候选基因进行功能互补、组织表达分析、亚细胞定位等相关实验。通过接菌实验和防御相关基因的表达量分析进一步探究SPL36功能缺失对植株抗病性的影响。最后对SPL36编码的的蛋白功能进行分析并进行一系列的盐处理实验,探究SPL36是否参与盐胁迫逆境应答。我们实验结果表明,spl36突变体出现细胞程序性死亡和叶片的提前衰老,SPL36参与程序性细胞死亡并通过上调防御相关基因在spl36突变体中诱导了防御反应。同时,水稻SPL36可能负调控盐胁迫相关反应。根据实验数据,我们发现的新的类病斑突变体spl36将有助于阐明细胞程序性死亡和抗病性的调控途径以及水稻耐盐的机制。具体研究结果如...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.1水稻类病变发生的可能机制及其影响

第一章文献综述7图1.1水稻类病变发生的可能机制及其影响Fig1.1Possiblemechanismofricelesionmimicmutationanditsimpact.1.6已报道的水稻类病变基因及其功能研究人员使用T-DNA、转座子和反转座子插入诱变、图位克隆等方法克....

图3.1野生型云稻和突变体spl36的表型分析

第三章结果与分析21第三章结果与分析3.1spl36的表型特征图3.1野生型云稻和突变体spl36的表型分析(A)分蘖期野生型和突变体spl36表型差异，标尺为6厘米；(B)分蘖期野生型和突变体spl36叶片的表型，标尺为2厘米；(C)遮光实验中突变体spl36遮光前后表型，标尺....

图3.3野生型和突变体spl36的叶绿体超微结构和叶绿素含量及净光合速率

第三章结果与分析23分蘖盛期的叶绿素含量测定发现，突变体spl36的叶绿素a、叶绿素b相比于野生型都极显著下降。我们进一步对该时期植株光合速率测定，结果表明突变体的净光合速率显著降低。叶绿体是光合作用的主要场所，我们推测光合速率和叶绿素含量的变化是由于叶绿体的结构发生了变化[73....

图3.4野生型和突变体spl36生理生化检测

第三章结果与分析24氧（ROS）积累会导致氧迸发，从而致使细胞受到损伤甚至触发细胞程序性死亡[75]。H2O2的含量和过氧化物酶（POD）的活性则与ROS的积累有着直接的关系，超氧化物歧化酶（SOD）是植物体中具有清除O2-的重要作用。通过对H2O2含量，POD活性和SOD活性的....

本文编号：3901520