Mutant p53及其下游基因Bche对Wilms瘤发展转移的作用

发布时间：2024-02-19 13:11

　　目的:Wilms瘤是一种实质性肿瘤多发于儿童,治疗方法通常为手术、化疗、放疗的联合治疗,通常情况下预后良好。然而,该肿瘤在经过一期治疗后会有10-15%的患者发生复发和转移,且出现复发和转移的患者中有将近30%的患者最终死亡。该病的致病机制尚不清楚。许多临床案例指出在Wilms瘤中能够检测到大量的Mutant p53,且有报道指出Mutant p53可以与Smad结合抑制p63进而促进TGFβ诱导的肿瘤细胞的转移。它还可以与其下游基因MLL1、MLL2相互作用促进肿瘤的生长,该机制为Gain-of-function,还可通过甲羟戊酸途径影响乳腺癌的进展,这可能预示着Mutant p53可能与Wilms瘤有关。在本研究中,我们旨在探讨Mutant p53及其下游基因对Wilms瘤发展转移的影响。方法:(1)选取Wi T49细胞作为Wilms瘤的细胞模型,常规培养与5%CO2培养箱中,每2天换一次液。通过细胞转染实验获得shegfp和shtp53的稳转株。其中shegfp为阴性对照组,shtp53为实验组。(2)提取Wi T49细胞的RNA进行QPCR实验检测tp53以及其相关靶基因的基因...

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图1在Wilms瘤中,Mutantp53不能通过Gain-of-functiong、甲羟戊酸途径以及tp53/SmadComplex影响肿瘤的进展

大连医科大学硕士学位论文27c.图2RNA-SEQ实验筛选出的基因确实随Mutantp53的敲低而下调。a.通过RNA-SEQ筛选出随Mutantp53下调的18个基因b.通过QPCR实验检测这18个基因的基因表达情况。c.通过QPCR实验检测shbche稳转株基因表达的情况。

图2RNA-SEQ实验筛选出的基因确实随

大连医科大学硕士学位论文283.tp53和Bche对Wilms瘤的增殖能力无明显影响WiT49细胞融合率达到70%时通过MTT实验对tp53和bche对Wilms瘤增殖能力的影响进行验证并以每孔5000个细胞种植到96孔板中，分别测量24h、48h、72h、96h在570nm下的....

图3tp53和Bche会明显影响Wilms瘤

大连医科大学硕士学位论文29shegfpshtp53图4Bche对Wilms瘤的迁移能力有明显影响，Mutantp53对Wilms瘤的迁移能力无明显作用。a.通过Woundhealingassay检测Bche对Wilms瘤迁移能力的影响。（n=5）b.通过Woundhealing....

图5:bche不能明显影响Wilms瘤的细胞a.通过平板细胞克隆实验检测Bche对W

大连医科大学硕士学位论文29shegfpshtp53图4Bche对Wilms瘤的迁移能力有明显影响，Mutantp53对Wilms瘤的迁移能力无明显作用。a.通过Woundhealingassay检测Bche对Wilms瘤迁移能力的影响。（n=5）b.通过Woundhealing....

本文编号：3902743