可控表达pGH转基因小鼠制备及其功能研究

发布时间：2024-02-21 15:45

　　作为一个诱导基因表达调控系统,四环素(tetracycline,Tet)调控系统在基因工程中已开始应用于复杂的生物发生反应、机体的疾病及行为等。它已成为研究某一基因功能的有效工具,尤其在转基因小鼠的基因功能上,得到了广泛的应用。生长激素(growth hormone,GH)在不同物种中均具有促进性成熟,提高瘦肉率,改善饲料转化率等优点,但也存在副作用,在转生长激素基因的动物上尤为明显。这可能由于转GH基因动物,都是全身过表达GH基因,而且外源GH基因从胚胎期到成年都持续发挥生物学效应,其机体发育的异常很可能和GH在全身多个组织器官中的自分泌异常有关。在Tet调控系统中,诱导底物四环素的浓度与外源基因表达水平在一定范围内呈正相关,因此,可以通过控制四环素及其衍生物强力霉素(doxycycline,DOX)的有无、浓度高低来调控所导入的外源基因表达水平,进而认识所导入基因在不同水平及不同生长阶段的表达,了解其在动物生长发育中作用,进一步深入研究GH生物学功能。本研究采用分子生物学方法,构建了猪生长激素(porcine growth hormone,pGH)真核细胞可诱导表达载体,采用阳离子...

【文章页数】：139 页

【部分图文】：

图１－１?Ｔｅｔ调控系统（维基Ｃｌ科）??Ｆｉｇｕｒｅ?１－１?Ｔｅｔ?ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｓｙｓｔｅｍ?（Ｆｒｏｍ?ｖｉｋｉｐｅｄｉａ）??

均是可逆的。四环素系统对表达有很严格的控制，特异性好，而ＥＲ系统有??时会有渗漏现象［２（）］。Ｔｅｔ调控系统是最常用的诱导表达系统，可用ｆ对真核细胞屮物学??的研究，被广泛应用于转基因动物中基因表达调控的研究。实Ｉ．作原理如图１－１所示。??ＯＭ?Ｏ?〇Ｈ?〇?Ｑ?．，？??＇....

图１－２?Ｔｅｔ－ｏｆｆ系统工作原理示意图（宝生物丁．程有限公ｎｊ?Ｔｅｔ－ｏｆｆ基因表达系统用户于册）??Ｆｉｕｒｅ?１－２?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｒａｍ?ｏｆ?ｗｏｒｋｉｎｒｉｎｃｉｌｅ?ｏｆ?Ｔｅｔ－ｏｆｆ?ｓｓｔｅｍ??

和ＴＲＥ两部分组成，ＴＲＥ—旦和四环素反式作用因子进行融合，就会激活启动子的下??游基因或相关基因的表达。??如图１－２所示，在Ｔｅｔ－ｏｆｆ调控系统中，如果外界存在四环素及其衍生物，ＴＲＥ调控??的相关基因表达就会受到抑制，四环紊及；Ｕ：衍生物会和四环素反式作用因子结合，这样?....

图１－３１＾－〇１１系统工作原理示意图（宝生物丁．程有限公司１＾－〇＃基因表达系统用户亍册）??Ｆｉｇｕｒｅ?１－３?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｗｏｒｋｉｎｇ?ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ?ｏｆ?Ｔｅｔ－ｏｎ?ｓｙｓｔｅｍ??

和ＴＲＥ两部分组成，ＴＲＥ—旦和四环素反式作用因子进行融合，就会激活启动子的下??游基因或相关基因的表达。??如图１－２所示，在Ｔｅｔ－ｏｆｆ调控系统中，如果外界存在四环素及其衍生物，ＴＲＥ调控??的相关基因表达就会受到抑制，四环紊及；Ｕ：衍生物会和四环素反式作用因子结合，这样?....

图１－４／基因簇的组成和表达产物（：＋：松艳“生长素基因表达的调控”）??

Ｆｉｇｕｒｅ?１－４?Ｔｈｅ?ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ?ｏｆ?ｈＧＨ?ｇｅｎｅ?ｃｌｕｓｔｅｒ?ａｎｄ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ??（Ｆｒｏｍ?ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｇｅｎｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ａｕｘｉｎ，?Ｗａｎｇ?ｓｏｎｇｙａｎ）??如图１－４所示，２个Ｇ／／基因和....

本文编号：3905633