脂肪组织特异性CREG基因敲除小鼠建立及鉴定

发布时间：2024-02-26 21:53

　　目的建立并鉴定脂肪组织特异性CREG基因敲除(AKO)小鼠。方法首先将CREG flox纯合子小鼠(基因型CREG^fl/fl)与脂肪组织特异性Cre工具鼠[基因型Adipoq-Cre⁽Tg(+))]交配。然后将获得的脂肪组织表达Cre的CREG flox杂合子小鼠[基因型CREG^fl/wt:Adipoq-Cre⁽Tg(+))]与CREG^fl/fl小鼠交配获得子代小鼠。第4周时采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)鉴定基因型,并计算不同基因型小鼠比例。采用PCR及Western Blot方法鉴定小鼠脂肪组织及心肌组织CREG转录及蛋白水平表达。结果共交配成功11只孕鼠,基因型鉴定82只子代小鼠。AKO小鼠[基因型CREG^fl/fl:Adipoq-Cre⁽Tg(+))]20只,CREG^fl/fl小鼠22只,符合孟德尔遗传定律。AKO小鼠脂肪组织CREG转录和蛋白水平均显著低于CREG^fl/fl小鼠...

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【部分图文】：

图1AKO小鼠繁育策略

以CREGfl/fl小鼠为对照组,定量PCR检测AKO小鼠脂肪组织及心肌组织CREG转录水平表达。AKO小鼠脂肪组织CREG转录水平为(0.06±0.01),显著低于CREGfl/fl小鼠的(1.02±0.13),差异有统计学意义(P<0.05);CREGfl/fl、AKO小鼠心....

图24种基因型小鼠代表性鉴定结果

图1AKO小鼠繁育策略图3CREGfl/fl、AKO小鼠脂肪及心肌组织CREG转录水平表达

图3CREGfl/fl、AKO小鼠脂肪及心肌组织CREG转录水平表达

图24种基因型小鼠代表性鉴定结果2.3AKO小鼠脂肪组织CREG蛋白水平表达

图4CREGfl/fl、AKO小鼠脂肪及心肌组织CREG蛋白表达

以CREGfl/fl小鼠为对照组,Westernblot法检测AKO小鼠脂肪组织及心肌组织CREG蛋白水平表达。AKO小鼠脂肪组织CREG蛋白表达为(0.04±0.01),显著低于CREGfl/fl小鼠的(1.01±0.21),差异有统计学意义(P<0.05);CREGfl/f....

本文编号：3911907