大肠杆菌及其氨基糖苷类修饰酶基因的分子鉴定

发布时间：2024-02-26 23:09

　　大肠埃希氏菌属于革兰氏阴性杆菌,俗称大肠杆菌。大多属于人肠道共生菌,一定条件下会引起肠道感染,有些特殊血清型具有致病性,严重的会引起败血症。大肠杆菌广泛存在于自然生态环境及医院、社区等各个社会环境中,有些病原性大肠杆菌对于免疫力低下的人群常引起严重流行性腹泻和肋膜炎等。抗生素发现以来,被广泛的应用到临床治疗中。然而,由于缺乏及时准确的大肠杆菌检测手段导致抗生素的滥用和误用,使临床上的大肠杆菌普遍出现耐药的情况。临床上很多抗生素已无法达到有效治疗的目的,治疗多耐药大肠杆菌感染变得十分艰难,这其中就包括了氨基糖苷类抗生素。而目前被认为是“金标准”的手工培养结合药敏实验的病原菌及耐药性检测的方法已逐渐无法满足临床的需求,十分耗时费力,难以快速诊断细菌感染并提供抗生素用药指导。临床检验中也有一些全自动检测仪器,但设备往往比较昂贵,难以在基层医疗机构推广。近年来,分子检测的方法以其检测精准、节省时间等优势逐渐被广泛接受。基于之前本实验室已有的鉴定肺炎克雷伯氏菌、铜绿假单胞菌等病原菌的研究基础,我们针对大肠杆菌及几种典型的氨基糖类抗生素耐药基因建立了一套快速、准确的分子检测方法。该方法相比传统的培...

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图2.1PCR评估大肠杆菌的特异基因

昆明理工大学硕士学位论文21图2.1PCR评估大肠杆菌的特异基因Figure2.1SpecificityofthePCRassayfordetectingthetargetgeneofthehypotheticalprotein.M：DLDNA2000marker；其后依次为：8....

图2.2LAMP评估大肠杆菌的特异基因Figure2.2SpecificityoftheLAMPassayfordetectingthetargetgeneofthehypothetical

昆明理工大学硕士学位论文22图2.2LAMP评估大肠杆菌的特异基因Figure2.2SpecificityoftheLAMPassayfordetectingthetargetgeneofthehypotheticalprotein.M:DLDNA2000marker；其后依次为....

图2.3以阳性质粒为PCR模板的灵敏度评估

昆明理工大学硕士学位论文23液直接裂解，经裂解后的菌液经稀释后用作灵敏度评估实验的模板，从108稀释至100个/μL。两种模板制备的灵敏度PCR评估结果如2.3及图2.4所示，结果表明，无论哪种方式制备的模板其检测下限均可达到100的数量级，说明本次实验所建立的大肠杆菌的PCR检....

图2.4以裂解后菌液为PCR模板的灵敏度评估

昆明理工大学硕士学位论文23液直接裂解，经裂解后的菌液经稀释后用作灵敏度评估实验的模板，从108稀释至100个/μL。两种模板制备的灵敏度PCR评估结果如2.3及图2.4所示，结果表明，无论哪种方式制备的模板其检测下限均可达到100的数量级，说明本次实验所建立的大肠杆菌的PCR检....

本文编号：3912003