烟芽夜蛾囊泡病毒RT-qPCR内参基因的筛

发布时间：2024-03-12 18:45

　　囊泡病毒是一类主要感染甜菜夜蛾Spodoptera exigua、斜纹夜蛾Spodoptera litura、棉铃虫Helicoverpa armigera等鳞翅目夜蛾科幼虫的双链环状DNA昆虫病毒,宿主幼虫感病后表现出明显的“急性致病”、“慢性致死”症状。自然界中,囊泡病毒主要通过寄生蜂的产卵行为进行传播,在甜菜夜蛾等重要害虫的生物防治领域具有较好的潜在应用价值,但就分子机理研究而言相对缺乏。本论文就烟芽夜蛾囊泡病毒Heliothis virescens ascovirus(HvAV)传播体系中各组件RT-qPCR内参基因开展了筛选工作,并且以新发现的毒株烟芽夜蛾囊泡病毒3i株(HvAV-3i)为例,结合其他已报道的毒株基因组学和蛋白组学进行了系统的比较分析,主要研究结果如下:1、囊泡病毒RT-qPCR内参基因筛选以烟芽夜蛾囊泡病毒3h株(HvAV-3h)为例,取病毒血淋巴(5.6×10⁸ pfu/ml)以10^-0、10^-2、10^-4、10^-6和10^-8...

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【部分图文】：

图2-1囊泡病毒传播体系中各内参基因表达水平

和28S则表现出较大变化幅度。根据图3-1B所示，当甜菜夜蛾感染囊泡病选内参基因中，整体而言表达量变化幅度较稳定，Ct值最低为12.44（2分散程度最大（6.75），ACT1则最为稳定。根据图3-1C显示，当病毒侵肪体细胞系后，28S（13.67）和EF1（27.0....

图2-2甜菜夜蛾9个候选内参基因geNorm分析

蛾9个候选内参基因geNorm分析。10-0病毒浓度（A）、10-2（C）、10-6病毒浓度（D）、10-8病毒浓度（E）、综合所有浓度M值，综合所有浓度样品所需内参基因最适数目（G）。Validationof9candidatereferencegenes....

图2-3斯氏侧沟茧蜂6个候选内参基因geNorm分析

综合排名DeltaCtgeNormNormFinderB几何平均值排名标准差排名M值排名稳性值排名标准-fold)4.1641.1960.6450.8850.-fold)8.0081.0680.7680.9481.f....

图2-4甜菜夜蛾脂肪体细胞系9个候选内参基因geNorm分析

-6倍病毒浓度下最不适合作为内参基因（图2-4A，B，C，D）。综合所有样品分析得到EF1/L10为最稳定的两个内参基因，28S则排名垫底（图2-4E），但所有内参基因M值均小于1.5。从变异系数分析表明，各病毒浓度处理下的甜菜夜蛾脂肪体细胞均能选取排名靠前的两个基因....

本文编号：3926713