低聚葡萄糖氧化酶的基因克

发布时间：2024-04-15 23:52

　　低聚葡萄糖氧化酶(Gluco-oligosaccharide oxidase,EC1.1.99.B3,GOOX)可特异性氧化葡萄糖及其通过α-1,4或β-1,4糖苷键连接构成的七糖及以下低聚糖,生成相应的醛糖酸。GOOX在糖酸制备及生物检测等领域有重要应用,但目前仅有三种GOOX被研究报道,开发新的GOOX对相关工业领域有实际应用价值。本研究对来自黑曲霉基因组和枯草芽胞杆菌基因组的低聚葡萄糖氧化酶基因进行了克隆表达与酶学性质解析,获得了如下结果:从枯草芽胞杆菌基因组中筛查到1个疑似编码低聚葡萄糖氧化酶的开放阅读框,在基因组不同位置克隆获得两段不同长度基因:bsgoox-L和bsgoox-S,二者的大小分别是1443 bp和1356 bp,同时在黑曲霉基因组中筛查到1个疑似编码低聚葡萄糖氧化酶的开放阅读框,angoox;进一步通过氨基酸序列比对可知,Angoox和Bsgoox分别与来源于A.piperis CBS 112811和Bacillus velezensis来源的低聚葡萄糖氧化酶具有较高相似性,相似度分别为97.26%和79.27%,二者皆有一个FAD结合域和黄素结构域,属于低聚...

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１?ＧＯＯＸ氧化机制??Ｆｉｇ?１．１?Ｏｘｉｄａｔｉｏｎ?ｍｅｃｈａｎｉｓｍ?ｏｆ?ＧＯＯＸ??１．２．４低聚葡萄糖氧化酶的催化特性和底物特异性??

源性［３９，４（）］，其中该蛋白被预测与植物细胞分裂??素脱氢酶和相关的黄素蛋白具有相同的结构同源性，这些黄素蛋白都具有保守??的黄素腺嘌呤二核苷酸ＦＡＤ结合域［４１］，每１?ｍｏｌ酶分子包含１?ｍｏｌ?ＦＡＤ［３２］。低??聚葡萄糖氧化酶中ＦＡＤ辅因子是与半胱氨酸和组氨酸（Ｃｙ....

图３－３枯草芽胞杆菌基因组电泳图??Ｆｉｇ．?３－３?Ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｇｅｎｏｍｅｏｆ?Ｂ．?ｓｕｂｔｉｌｉｓ??

天津科技大学硕士学位论文??图３－２不同来源的低聚葡萄糖氧化酶的氨基酸序列比??来源于Ａ?ＣＢＳ?５１３．８８和来源５．?ｓｗｆｏｚ＇／ｈ?１６８的低聚葡萄糖氧化酶用下划线来表示；??ＦＡＤ结构域开始与结束位点用圆框标出；黄素结构域用方框标出；ＦＡＤ连接活性中心用阴??影标注，其....

图３－４黑曲霉ＲＮＡ电泳图??Ｆｉ．?３－４?Ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｏｆ?Ａ．ｎｉｇｅｒ??

结果与讨论??１?２??＾０＝１２！｜??ＰＨ??图３－４黑曲霉ＲＮＡ电泳图??Ｆｉｇ．?３－４?Ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｏｆ?Ａ．ｎｉｇｅｒ??１，２全部为所提取的ＲＮＡ??３．２．３黑曲霉ｃＤＮＡ的合成与基因的扩增??....

图３－５黑曲霉目的基因ＰＣＲ产物电泳图??Ｆ．－ａｒｏｓｅｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｈｏｒｅｓｉｓ?ａｎａｌｓｉｓ?ｏｆ?ＰＣＲｒｏｄｕｃｔｓ?ｆｒｏｍ?＾４．?ｎｉｅｒ??

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本文编号：3956135