潘那利番茄SpCPK8基因的克

发布时间：2024-04-16 21:38

　　钙依赖蛋白激酶在植物生长发育及生物和非生物胁迫响应过程中发挥重要作用。本文从野生番茄潘那利中获得了一个钙依赖蛋白激酶基因SpCPK8,对其进行了理化性质、蛋白结构、进化树、原核表达和亚细胞定位分析。结果显示,该基因包含一个1 674 bp的完整开放读框,编码557个氨基酸,主要定位于细胞膜上;SDS-PAGE电泳及Western blot结果显示, SpCPK8重组蛋白的分子量约为62.22 kDa;进化树分析发现,其编码的氨基酸与马铃薯StCDPK4亲缘关系最近。RT-qPCR分析发现, SpCPK8在叶片中的表达量最高,且在干旱胁迫下表达量显著上调,能够积极响应干旱胁迫。本实验结果表明野生番茄SpCPK8是积极响应干旱胁迫的调节因子,为进一步研究植物CDPK的功能提供理论基础。

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

图1潘那利番茄SpCPK8基因的cDNA扩增(A)及重组质粒pET-30a-SpCPK8的双酶切鉴定(B)

测序结果显示SpCPK8基因序列全长为1674bp,编码557个氨基酸,其分子量大小为62.22kDa,理论等电点为5.55;其中含45个丝氨酸(Ser)8.1%、44个亮氨酸(Leu)7.9%、42个甘氨酸(Gly)7.5%,预测分子式为C2730H4282N758O847....

图2SpCPK8进化树分析

CDPK被认为是植物响应非生物胁迫的关键激酶(Valmonte等2014),它几乎在植物的所有部位均有表达。自1984年在豌豆(Pisumsativum)中发现第一个植物CDPK基因后(Hetherington和Trewavas1984),目前已在拟南芥(Arabidopsis....

图3SpCPK8及其高度同源蛋白的保守结构域分析

在CDPK家族的4个特征结构域中,不同物种的N端结构域序列差异很大,其长度与蛋白质定位相关(Schulz等2013)。CDPKs表现出的多种亚细胞定位模式,表明它们参与了多种信号通路。研究表明,CDPK中的肉豆蔻酰化序列与膜定位相关(Resh2006),一些肉豆蔻酰化的蛋白质需....

图4SpCPK8表达模式分析

图3SpCPK8及其高度同源蛋白的保守结构域分析图5SDS-PAGE电泳及Westernblot检测

本文编号：3956723