维生素E和植酸酶性状聚合转基因玉米的获得和鉴定

发布时间：2024-04-17 18:22

　　玉米是动物饲料的主要原料,但玉米籽粒中高活性的α-生育酚含量较低,而且玉米籽粒中的磷主要是以有机磷—植酸磷的形式存在,单胃动物不能有效吸收利用。因此,饲料中需要添加合成的DL-α-生育酚醋酸酯和无机磷或者微生物来源的植酸酶来满足动物生长发育的需要,这使得饲料成本大大增加,而且未被消化的植酸磷还会随动物粪便排出体外造成磷污染。为此,本研究构建了多基因串联表达载体,利用农杆菌侵染法转化玉米,获得了维生素E含量和植酸酶酶活均提高、且具有草铵膦抗性的转基因玉米材料,并对转基因玉米的分子特征、农艺性状以及籽粒营养成分等进行了分析。主要结果如下:1、构建了含有多基因表达盒的表达载体pCAMBIA3301ZTAO和pCAMBIA3301ZTGHAO,载体pCAMBIA3301ZTAO含有胚特异性启动子13387驱动、Glb1终止子终止的玉米γ-生育酚甲基转移酶基因ZmTMT表达盒,胚乳特异性启动子123387驱动、LEG1终止子终止的植酸酶基因AO表达盒和组成型启动子CaMV35S驱动、CaMV35S polyA终止子终止的草铵膦抗性基因Bar表达盒三个表达盒;载体pCAMBIA3301ZTGHAO...

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图1-1维生素E合成途径（DELLAPENNA,2005；DELLAPENNAetal.,2011）

中国农业科学院硕士学位论文第一章绪论2图1-1维生素E合成途径（DELLAPENNA,2005；DELLAPENNAetal.,2011）Figure1-1PathwayofvitaminEbiosynthesis（DELLAPENNA,2005；DELLAPENNAetal.,....

图1-2技术路线

中国农业科学院硕士学位论文第一章绪论9物利用率也仅为天然α-生育酚的五分之一左右（MARUSICHetal.,1967；CHENGetal.,2016）。而目前，国际市场上植酸酶占饲料酶市场总量的40％，高达30万吨以上，对于标准化为5000FTU/g的产品（工业植酸酶制剂的浓度....

图3-1pCAMBIA3301ZTAO载体图谱

中国农业科学院硕士学位论文第三章结果与分析30第三章结果与分析3.1转ZmTMT和AO基因玉米植株的获得和鉴定3.1.1载体构建及转基因植株的获得通过目的基因ZmTMT和AO的酶切和连接获得pCAMBIA3301ZTAO植物表达载体，如图3-1所示。其中ZmTMT由玉米胚特异启动....

图3-2ZTAO转基因玉米的筛选和鉴定Figure3-2ScreeningandidentificationofZTAOtransgenicmaize.A、B、C：依次分别为目的基因Bar、ZmTMT、AO的PCR检测结果；1-6：事件ZTAO-1#的纯系植株；7-12：事件ZTAO-2#的纯系植株；M：1kbDNA分子质量标准

中国农业科学院硕士学位论文第三章结果与分析31为了得到ZTAO的转基因纯系材料，喷洒草铵膦后叶片全为绿色的转基因玉米，进一步进行PCR鉴定。ZTAO-1#和ZTAO-2#转基因材料中Bar、ZmTMT、AO基因的PCR检测结果如图3-2所示，Bar基因以bar-F和bar-R作为....

本文编号：3956743