拟南芥mMDH2基因在调控镉胁迫响应中的功能研究

发布时间：2024-04-25 05:04

　　环境污染问题越来越严重,其中土壤重金属对环境的污染日益加深,而土壤重金属污染治理与防治对确保障农作物的安全和产量有着重要意义。该实验课题主要研究拟南芥线粒体苹果酸脱氢酶基因mMDH2在调控镉胁迫响应中的功能研究,其表达可被外源添加的CdCl₂抑制。然而,其在镉胁迫信号下的一些功能以及应答机制尚不清楚。为此,围绕此问题进行了深入研究,具体研究结果如下:1.拟南芥T-DNA插入突变体mmdh2-1、mmdh2-2植株在CdCl₂胁迫条件下与WT植株相比,其表现出耐受,说明拟南芥中的mMDH2基因可能在镉胁迫条件下发挥重要作用。2.构建mMDH2过表达载体。使用特异性引物,通过PCR克隆mMDH2基因,将其连接到带有35S启动子的载体上;然后将35S::mMDH2载体转入到农杆菌GV3101菌株中,最后将其转入野生型的拟南芥体内,筛选获得阳性过表达植株。3.分析在Cd胁迫下mMDH2过表达植株的表型,发现与野生型相比,其表现敏感,表明拟南芥mMDH2基因在镉胁迫应答中起负调控作用。4.DAB染色结果分析发现,在镉胁迫处理条件下,mmdh2突变体植株...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图3.1苹果酸脱氢酶同源分析

如图3.1C所示。表明它与拟南芥中的其他苹果酸脱氢酶显示出较低的同源性。图3.1苹果酸脱氢酶同源分析。A.拟南芥MMHD2和不同植物的MDH蛋白的氨基酸序列比对；B.MMHD2基因与不同植物MDH基因的系统进化树；C.拟南芥中MMHD2基因与其他MDH....

图3.2拟南芥mMDH2基因组织特异性表达

第三章结果与分析芥mMDH2基因组织特异性表达的研究中，我们发现编码细胞质苹果酸脱氢酶的CMDH4耐受性[82]。为了确定线粒体苹果酸脱氢酶mMDH2基因是否作用，首先检测了mMDH2基因在拟南芥不同组织中的表，拟南芥不同的组织中，不同的基因转录水平不尽相同，影....

图3.3mMDH2基因在镉诱导下被抑制

图3.3mMDH2基因在镉诱导下被抑制。Fig3.3mMDH2geneisinhibitedbycadmium.mMDH2-GUS材料的构建基因启动子扩增MDH2基因表达模式，我们构建了拟南芥PromMDH如图3.4A所示。首先，在拟南芥TAI....

图3.4mMDH2基因启动子克隆

因启动子克隆。A.PromMDH2-GUS载体结构；B.mMDH图。fmMDH2geneclone.A.StructureofPromMDH2-GUS;Bcloneelectropherogram.2-GUS重组载体阳性菌株鉴定的启动子片段从琼脂糖凝胶中切....

本文编号：3964048