蝉拟青霉几丁质酶基因鉴定与表达模式分析

发布时间：2024-05-19 23:34

　　蝉拟青霉(Pfaecilomyces cicadae)作为一种在我国研究较早的昆虫病原真菌,其对鳞翅目、半翅目等农业害虫具有致病能力。然而该菌基础研究,尤其是致病机理知之甚少,在一定程度上限制了该菌在害虫生物防治上的应用。鉴于此,本研究对蝉拟青霉基因组进行测序,筛选毒力相关基因,鉴定了 18个蝉拟青霉几丁质酶基因,并对这些基因的分类、结构域、表达模式进行了分析。本研究结果对进一步阐述蝉拟青霉的致病机制、提高其防治效果和应用潜力具有重要的理论研究意义和实际应用价值。主要研究结果如下:(1)蝉拟青霉菌株ZJ1611的基因组G+C含量为53.11%,基因组大小约为33.8 Mb,共包括11106个基因。与其他昆虫病原真菌基因组比较显示蝉拟青霉的基因组大小与蛹虫草(Cordyceps militaris)和球孢白僵菌(Beauveria bassiana)基因组相似,但小于绿僵菌属病原真菌(Metarhizium robertsii、M.anisopliae和M.acridum)基因组。(2)从蝉拟青霉基因组中筛选出了41类蛋白家族共464个毒力相关基因。对挑选出的不同侵染阶段的蝉拟青霉16个...

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２基因敲除载体的构建流程图??Ｆｉｇｕｒｅ?２?Ｔｈｅ?ｆｌｏｗ?ｃｈａｒｔ?ｏｆ?ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｇｅｎｅ?ｋｎｏｃｋ?ｏｕｔ?ｖｅｃｔｏｒ??

Ｂ?（Ｈｙｇｒｏｍｙｃｉｎ?Ｂ，ＨＰＨ）（浓度分别为?０、１００、２００、３００、４００、??５００?ｎｇ／ｍＬ）和草甘膦（Ｇｌｙｐｈｏｓａｔｅ，ＰＭＧ）（浓度分别为?０、１００、２００、３００、４００、??５００?ｍｍｏｌ／Ｌ）的ＰＤＡ平板上，每个浓度重复三次，１５?ｄ后观察菌....

图７蝉拟青霉１６个毒力基因的转录水平检测??Ｆｉｇｕｒｅ?７?Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ?Ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ?ｏｆ?１６?ｃｉｃａｄａｅ?ｖｉｒｕｌｅｎｃｅ?ｇｅｎｅｓ??

．１９?－?ｆｏｒｋｈｅａｄ?（ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ?ｆａｃｔｏｒ）?３，４??ＰＣｐｔａ?１１９．２４?１０８８?７．８８?－?Ｐ－ｔｙｐｅ?ＡＴＰａｓｅ?４??注：基因特征及所参与的反应阶段参照表４。??４．３．２蝉拟青霉毒力基因的转录水平检测及表达模式分析??根据昆虫....

图１５不含有ＤＮＡ模板的ＰＣＲ产物凝胶电泳图??Ｆｉｇｕｒｅ?１５?Ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆＰＣＲ?ｐｒｏｄｕｃｔｓ?ｗｉｔｈｏｕｔ?ＤＮＡ?ｔｅｍｐｌａｔｅ??

的ＭＭ培养基中生长的菌丝??体）；ＣＨ丨（在含有１％几丁质的ＭＭ培养基中生长的菌丝体）；丨＞Ｘ?（在含有０．５％小菜蛾虫体粉末的ＭＭ培养基??中生长的菌丝体）；ＡＭ?（自溶培养基培养的菌丝体）；Ｃ?（分生孢子）；ＡＰ?（诱导的附符胞）：ＢＳ?（诱导的芽生孢??子）。ＤＮＡ?（以基....

图１９蝉拟青霉基因的敲除策略??Ｆｉｇｕｒｅ?１９?Ｔｈｅ?ｄｅｌｅｔｉｏｎ?ｍｕｔａｎｔ?ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｇｅｎｅｓ?ｆｒｏｍ??

ＣＫ?ｌＯＯｐｇ／ｍＬ?２Ｑ０｜ｑｇ／ｍＬ?３ＱＯ｜ｑｇ／ｍＬ?４Ｑ〇ｎｇ／ｍＬ?５ＱＯ｜ｉｇ／ｍＬ??ＳＵＬ?ＩＩ?ＩＴ??图丨８蝉拟青霉对潮霉素Ｂ和草甘膦浓度的敏感性实验??Ｆｉｇｕｒｅ?１８?Ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ?ｔｅｓｔ?ｏｆ?Ｐ．ｃｉｃａｄａｅ?ｆｏｒ?ｈｙｇｒｏｍｙ....

本文编号：3978618